Найти в Дзене

Билирубин. Спектрофотометрия. Диазо-сульфаниловый метод

Читать на vmdg.ru Описание Билирубин – побочный продукт, получающийся в основном из гемоглобина, высвобождаемого стареющими или поврежденными эритроцитами, которые разрушаются системой мононуклеарных фагоцитов. После продукции, билирубин транспортируется в печень вместе с альбумином. В гепатоцитах билирубин образует конъюгат с глюкуроновой кислотой и экскретируется в желчь. Билирубин является пигментом и имеет характерный жёлто-оранжевый цвет. Уже относительно невысокие концентрации билирубина в плазме крови или моче придают им характерную жёлтую окраску. Клиническим проявлением гипербилирубинемии является желтуха, заключающаяся в отложении желчных пигментов и приводящая к желтоватой окраске кожи и слизистых. Интерпретация (собаки и кошки) Билирубины стабильны в сыворотке крови в течение 2 суток при условии отсутствия освещения. В сильно гемолизированных образцах результаты могут быть ложно завышены. Повышенные результаты биохимического исследования билирубинов могут свидетельствовать
Оглавление

Читать на vmdg.ru

Описание

Билирубин – побочный продукт, получающийся в основном из гемоглобина, высвобождаемого стареющими или поврежденными эритроцитами, которые разрушаются системой мононуклеарных фагоцитов. После продукции, билирубин транспортируется в печень вместе с альбумином. В гепатоцитах билирубин образует конъюгат с глюкуроновой кислотой и экскретируется в желчь.

Билирубин является пигментом и имеет характерный жёлто-оранжевый цвет. Уже относительно невысокие концентрации билирубина в плазме крови или моче придают им характерную жёлтую окраску. Клиническим проявлением гипербилирубинемии является желтуха, заключающаяся в отложении желчных пигментов и приводящая к желтоватой окраске кожи и слизистых.

Рисунок 1. Общая схема образования билирубина
Рисунок 1. Общая схема образования билирубина

Интерпретация (собаки и кошки)

Билирубины стабильны в сыворотке крови в течение 2 суток при условии отсутствия освещения. В сильно гемолизированных образцах результаты могут быть ложно завышены. Повышенные результаты биохимического исследования билирубинов могут свидетельствовать о повреждении печени, обтурации желчных протоков, гемолитической анемии и других патологий.

Билирубин общий:

  • Собаки: <13,0 ммоль/л
  • Кошки: <10 ммоль/л

Билирубин прямой:

  • Собаки: <5,5 ммоль/л
  • Кошки: <5,5 ммоль/л

Метод измерения

Билирубин пробы реагирует с диазо-сульфаниловой кислотой с образованием цветного комплекса, который может быть измерен спектрофотометрически:

  • Оптическая плотность измеряется с применением светофильтра (λ ≈ 535 нм);
  • Тип реакции – конечная точка;
  • Время стабилизации окраски: общий билирубин – около 10 минут, прямой билирубин около – 5 минут;
  • Калибровочная функция – одноточечная (по стандартному образцу).

Прямой и непрямой билирубин реагируют с диазореактивом в присутствии растворяющего реагента. Термин «прямой» и «непрямой» относится к реакционным характеристикам сывороточного билирубина в отсутствии или присутствии растворяющего (ускоряющего) реагента, которые только приблизительно являются эквивалентами конъюгированной и неконъюгированной фракциям.

Интерференция – гемоглобин (10 г/л) не влияет на результат. Хилёзные образцы (триглицериды свыше 4,42 ммоль/л) могут влиять на результаты исследования.

Литература

1. Pearlman F C and Lee RTY. Detection and measurement of total bilirubin in serum, with use of surfactants as solubilizing agents. Clin. Chem. 1974; 20: 447-453

2. Е.Н. Бурмистров ШАНС БИО: Лабораторная диагностика. – 6-выпуск. – М.: 2021. – 322 с.