Привет! Сегодня расскажу о том, как различают живые сперматозоиды от мертвых. Ведь даже живой может лежать и не двигаться. Мертвые обездвиженные сперматозоиды и живые обездвиженные сперматозоиды – две разные истории…
Итак, жизнеспособность сперматозоидов оценивается по целостности мембраны клетки. Его можно определять в любом случае, но особенно важна эта оценка, когда содержание прогрессивно-подвижных сперматозоидов меньше чем 40%.
Этот вид оценки может помочь получить данные о подвижности сперматозоидов, потому как доля мертвых клеток никогда не превышает процентное содержание неподвижных сперматозоидов.
Живые сперматозоиды можно отличить от мертвых наличием всех частей и органелл клетки. Вторым критерием может быть отсутствие окрашивания или набухание. В первом случае сперма окрашивается и те сперматозоиды, которые не окрасились считаются живыми, так как их клеточная мембрана пропускает краску. Второй способ определяет живых сперматозоидов по набуханию в гипотонических растворах.
Во имя избегания температурных колебаний и дегидратации оценку жизнеспособности сперматозоидов следует проводить после 30 минут инкубации в термостате или по прошествии не более одного часа разжижения.
Клинически важно знать является ли неподвижный сперматозоид живым или мертвым. Поэтому важно проводить оценку жизнеспособности на том препарате, на котором проводили оценку подвижности сперматозоидов.
Если сперматозоиды живые, но неподвижные – проблема со жгутиками. Если сперматозоиды неподвижны, и мертвые, то это указывает на проблему в эпидидимисе.
ТЕСТ НА ЖИЗНЕСПОСОБНОСТЬ МЕТОДОМ ОКРАШИВАНИЯ ЭОЗИН-НИГРОЗИНОМ.
Здесь нигрозин используется для увеличения контрастности между фоном и головками сперматозоидов. Этот метод также дает возможность оценить качество.
Интерпретируем результаты так: живые сперматозоиды имеют белые или бледно розовые головки, а мертвые имеют окраску темно-розовые. Если окрашена только зона шейки, а остальная часть головки сперматозоида не окрашена, то мембрана просто имеет нарушения, но клетка считается живой.
Минимальное референсное значение жизнеспособности сперматозоидов с интактной мембраной – 58%.
Общее число сперматозоидов с интактной мембраной в эякуляте имеет биологическое значение. Чтобы получить интересующее нас значение нужно умножить общее число сперматозоидов в эякуляте на число клеток с интактной мембраной.
ТЕСТ НА ЖИЗНЕСПОСОБНОСТЬ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ЭОЗИНА.
Тест простой и быстрый, но препараты не подлежат контролю качества после анализа.
В аликвоту спермы, предварительно перемешав, добавляем аликвоту эозина. Расчитываем число окрашенных и не окрашенных сперматозоидов.
Живыми считаем сперматозоиды белого или светло-розового цвета, мертвыми мы засчитываем красные и темно-розовые головки сперматозоидов.
Аналогично, если окрашена зона шейки, то это не говорит, что сперматозоид имеет дезинтегрированную мембрану, и считаем ее живой.
В случае, сложности интерпритации результатов, стоит использовать нигрозин для увеличения контрастности.
Минимальное референсное значение жизнеспособности сперматозоидов с интактной мембраной – 58%.
Общее число сперматозоидов с интактной мембраной в эякуляте имеет биологическое значение. Умножаем число общего числа сперматозоидов на процент клеток с интактной мембраной.
ТЕСТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ГИПООСМАТИЧЕСКОГО РАСТВОРА.
Тест гипоосматическим набуханием используется как альтернатива окрашиванию. Этот метод используется тогда, когда нужно применить метод ИКСИ. Сперматозоиды с интактными мембранами набухают в течение 5 минут, а хвостики приходят в норму к 30 минуте.
Так, для рутинной диагностики используем инкубацию в 30 минут, для терапевтических целей используем инкубацию в течение 5 минут.
Интерпретация результатов: изменение формы клетки сперматозоида, то есть набухшие клетки считаем живыми. Также и хвостики сперматозоидов набухают и все сперматозоиды с набухшими жгутиками мы засчитываем за живые клетки.
Минимальное референсное значение жизнеспособности сперматозоидов с интактной мембраной – 58%.
Общее число сперматозоидов с интактной мембраной в эякуляте имеет биологическое значение. Умножаем число общего числа сперматозоидов на процент клеток с интактной мембраной.
Сегодня статья похожа на сухую лекцию. Если понравилась статья, пожалуйста, ставьте лайки. Подписывайтесь на канал и закрепите в подписках. Это очень полезно и будет мудрым решением, потому что не стоит избегать мыслей о родительстве.
Читайте другие мои статьи: