Кого я вижу?!

Разберемся на берегу с определениями:

Нормальное оплодотворение – то есть произошло проникновение сперматозоида (по большей части его ядра) внутрь яйцеклетки и отделилось 2 полярное тело яйцеклетки - эмбриолог видит два пронуклеуса/ядра (2PN) и 2 полярных тела через 16-18 часов после оплодотворения.

Бывает, что оплодотворение происходит аномальным образом:

• 0PN (не видно пронуклеусов),
• 1 PN (1 пронуклес),
• 2+1 (2 нормальных пронуклеса и 1 маленький),
• 3 PN (3 пронуклеса)

Что было известно ранее?

• По идее аномальное оплодотворение – возможный маркер неправильного (гаплоидного/триплоидного) набора хромосом в эмбрионе; однако все более широкая практика продления культивации до стадии бластоцисты для всех эмбрионов, независимо от статуса оплодотворения, показала, что многие зиготы, полученные из аномально оплодотворенных ооцитов, формируют высококачественные бластоцисты. При тестировании эти бластоцисты могут демонстрировать диплоидный генетический состав и даже приводить к здоровым беременностям.
• Частота встречаемости зигот с 1PN варьирует от 1 до 8%, а с 3PN - от 1 до 7%, и исключение таких зигот из клинического использования сокращает пул доступных зигот в когорте на 10%

Что сделали?

Ретроспективное исследование 1982 эмбрионов с нормальным оплодотворением и 380 эмбрионов с нетипичной картиной, проверенных на анеуплоидии и плоидный статус с помощью преимплантационного генетического тестирования (ПГТ) в период с мая 2019 по май 2024 года.

А зачем?

Хотели выявить связь между статусом оплодотворения и плоидностью + выяснить смогут ли полученные данные в будущем дополнять ПГТ.

+ исследования:

• проанализировали один из крупнейших наборов данных зигот с аномальным оплодотворением,
• выводы подтверждены двумя независимыми методологиями (NGS и платформами SNP-массивов), демонстрирующими постоянное соотношение аномалий плоидности в эквивалентных категориях аномальных ПН.

Итоги:

• Аномальные результаты плоидности у эмбрионов, полученных в результате 2PN, составили 1% (n= 20/1982): 0,8 % показали триплоидию (3 пронуклеуса) и 0,2 % гаплоидию.

При атипичном оплодотворении результаты были следующими:

• 0PN (n= 150/380) ассоциируется с 87,3% диплоидии, 8,7% гаплоидии и 4,0% триплоидии;
• 1PN-бластоцисты (n= 73/153) были гаплоидными в 47,7% случаев, 6.5 % были триплоидными и 45,7 % диплоидными;
• 2+1PN (n= 23/280) и 3PN (n= 54/280) показали триплоидный результат в 34,8 % и 74,1 % случаев, соответственно (см на картинке ниже)

Рис 1. Плоидность в зависимости от оплодотворения.

• Наблюдение за PN с помощью системы time-lapse увеличило предсказуемость плоидного статуса с 28,3 до 80,4 % (p< 0,01) и снизило ожидаемую частоту диплоидных результатов до 19,6 % (p< 0,01).

Рис 2. Плоидность аномально оплодотворенных зигот, подтвержденная данными time-lapse

• Частота диплоидии была выше у матерей в возрасте≤ 35 лет и у морфологически высококлассных эмбрионов.

Какие выводы делают авторы?

• Морфологическая проверка PN может быть улучшена путем включения анализа плоидности в обычный рабочий процесс ПГТ.
• Эуплоидные эмбрионы, полученные с помощью 2PN, могут быть дополнительно отобраны для удаления гаплоидов и триплоидов, а некоторые атипичные PN-паттерны могут быть лучше классифицированы.

А нам что полезного?

Согласно данному исследованию

• Бластоциста, полученная после 3PN оплодотворения с малой вероятностью будут эуплоидной, в то же время после 0PN, напротив, скорее всего эуплоидна.
• НО! Клиникам ЭКО, желающим создать внутреннюю программу по «спасению» эмбрионов с аномальным оплодотворением, рекомендуется определить свой собственный показатель диплоидии для различных состояний PN и установить конкретные показания для проведения плоидного теста (ведь разный возраст пациенток и тд вносит свои коррективы)
• Применение системы time-lapse может быть эффективно в оценке плоидности (этому посвящено множество статей, но опять-таки все упирается в обнаружение наиболее значимых маркеров развития (споры продолжаются) и оценку их не с помощью человека, а искусственного интеллекта)