Здравствуйте Всем) Сегодня расскажу про свои попытки клонирования орхидей из почек на питательной среде. До этого я пыталась получить деток со срезанных цветоносов в бутылках с водой, в течении 2 месяцев ничего не наблюдалось, я решила попробовать клонирование.
16.01.25 предварительно простерилизовав черенки в перекиси водорода поместила их в среду.
На 3-й день 19.01.25 я заметила, что практически во всех баночках появляется плесень, решила всё переделать. Сварила новую среду по тому же рецепту, что и в первый раз + добавила Метронидазол (читала, что добавляют Азитромицин, но его у меня не оказалось). Череночки с почками выдержала в Превикуре часа два, затем в расворе хлорки (1:9) также пару часов (чтобы наверняка 😄), обновила срезы и вновь поместила их в среду, работая над паром, инструменты и руки обрабатывала раствором хлорки (1:3).
И так, новый отсчёт 19.01.25 - день 1-й...
22.01.25 4-й день: в 4 баночках появилась плесень, осталось 9.
23.01.25 5-й день: еще минус 2, осталось 7.
25.01.25 7-й день: еще в 2 баночках замечен рост плесени.
28.01.25 10-й день: еще минус 3, осталось 2.
Оставшиеся 2 баночки не внушают надежд, мне кажется черенки в них погибли (почернели).
В неиспользованных баночках со средой роста плесени не наблюдается.
Следовательно, имеются погрешности в методике стерилизации эксплантов (черенков с почками).
Первыми стали плесневеть более "старые" черенки (по давности срезки цветоносов). Второй вывод, который можно сделать - нужно использовать свежесрезанный материал.
На просторах интернета в поисках информации, когда же почки должны пойти в рост я наткнулась на интересное исследование https://translated.turbopages.org/proxy_u/en-ru.ru.c8ba15fc-67900f03-77f0683e-74722d776562/https/www.frontiersin.org/journals/sustainable-food-systems/articles/10.3389/fsufs.2024.1359486/full
Ответ на свой вопрос в этом исследовании я нашла - 14 недель 🫣, всего 40 недель. Также в исследовании описывается способ стертлизации эксплантов, опробую и его.
Но я не отчаиваюсь, учла ошибки, подготовилась (закупила Стрептомицин и Карбендазим (Бавистин), спиртовые салфетки, соорудила бокс).
Сегодня 07.02.25 г попытка #3