{"draftJsState":{"blocks":[{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Принцип колоночной хроматографии","type":"header-two","key":"4sdtm"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[{"key":0,"length":13,"offset":31},{"key":1,"length":23,"offset":105},{"key":2,"length":5,"offset":411},{"key":3,"length":12,"offset":428},{"key":4,"length":8,"offset":442},{"key":5,"length":13,"offset":617}],"inlineStyleRanges":[{"length":24,"offset":0,"style":"BOLD"}],"text":"Колоночная хроматография — это аналитическая процедура или принцип разделения и очистки неорганических и органических соединений. Она может использоваться для разделения веществ на основе дифференциальной адсорбции соединений на адсорбенте, таком как активированный оксид алюминия или силикагель. Колоночная хроматография может использоваться в основном для очистки и разделения органических молекул, таких как белки, пигменты, аминокислоты, ферменты и крахмал. Это чрезвычайно трудоёмкий метод в любой лаборатории, но мы использовали его из-за низкой стоимости. Мы также использовали метод автоматической колоночной хроматографии для разделения и очистки соединений.","type":"unstyled","key":"f98kl"},{"data":{"image":{"id":"674970582256fe386cface15"}},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"","type":"atomic:image","key":"ek16u"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[{"key":6,"length":18,"offset":0}],"inlineStyleRanges":[],"text":"Выбор растворителя — самый важный этап в процедуре колоночной хроматографии, поскольку от выбора растворителя зависит степень адсорбции.","type":"unstyled","key":"coolv"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Процедура колоночной хроматографии","type":"header-two","key":"58ro"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Процедура колоночной хроматографии используется для разделения смеси различных соединений с помощью следующих этапов:","type":"unstyled","key":"3vict"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Адсорбент","type":"unordered-list-item","key":"9ss7r"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Выбор растворителя","type":"unordered-list-item","key":"450u3"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Упаковка колонны","type":"unordered-list-item","key":"5khr1"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Размещение образца","type":"unordered-list-item","key":"949df"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Разработка хроматограммы","type":"unordered-list-item","key":"bcm1a"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Адсорбент","type":"header-two","key":"8c71d"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[{"key":7,"length":14,"offset":267}],"inlineStyleRanges":[],"text":"Активированный оксид алюминия (Al2O3) и силикагель (SiO2) являются наиболее часто используемыми и коммерчески доступными адсорбентами в методе колоночной хроматографии. Активированный оксид алюминия и древесный уголь являются сильными адсорбентами. Карбонат кальция, фосфат кальция, магнезия и гашёная известь являются примерами промежуточных адсорбентов.","type":"unstyled","key":"7jlie"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Органические соединения, такие как сахароза, крахмал и инсулин, действуют как слабые адсорбенты. Усвояемость органических соединений зависит от природы и количества полярных групп, присутствующих в конкретных соединениях.","type":"unstyled","key":"5g9fl"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Выбор растворителя для колоночной хроматографии","type":"header-two","key":"argv1"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Адсорбция зависит от выбора растворителя в процессе колоночной хроматографии. Для помещения вещества в колонку используется относительно неполярный растворитель, но для получения хроматограммы используется полярный растворитель.","type":"unstyled","key":"fh0ai"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Полярность растворителя постепенно увеличивается по мере вымывания поглощённого вещества. Скорость вымывания контролируется изменением активности абсорбента и полярности растворителя. Это чисто эмпирический метод.","type":"unstyled","key":"5qub2"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Если соединения вымываются быстро, разделение получается некачественным. Для медленного вымывания мы использовали менее агрессивный абсорбент и слабополярный растворитель. Поэтому для слабоабсорбируемых соединений мы выбираем неполярные растворители, а для сильноабсорбируемых — полярные.","type":"unstyled","key":"4509h"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[{"key":8,"length":10,"offset":0}],"inlineStyleRanges":[],"text":"Полярность и выбор растворителя являются наиболее важными этапами в процедуре колоночной хроматографии. Порядок полярности обычно используемых растворителей следующий:","type":"unstyled","key":"keku"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[{"key":9,"length":6,"offset":81},{"key":10,"length":6,"offset":90},{"key":11,"length":6,"offset":124},{"key":12,"length":7,"offset":133},{"key":13,"length":4,"offset":143},{"key":14,"length":16,"offset":160}],"inlineStyleRanges":[],"text":"Петролейный эфир < четыреххлористый углерод < циклогексан < сероуглерод < эфир < ацетон < бензол < этилацетат < хлороформ < этанол < метанол < вода < пиридин < уксусная кислота.","type":"unstyled","key":"angt7"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Упаковка для колоночной хроматографии","type":"header-two","key":"196nt"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Наполнение колонки в процессе хроматографии очень важно, так как позволяет избежать пузырьков воздуха и ошибок при разделении. Трубка колонки тщательно очищается и высушивается.","type":"unstyled","key":"4vi13"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"После использования растворителя его нельзя оставлять высыхать до завершения эксперимента. Колонки для хроматографии готовят методом сухой или влажной набивки.","type":"unstyled","key":"8l2m9"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Сухая упаковка при колоночной хроматографии","type":"header-three","key":"2kqbt"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Мы использовали стеклянную трубку с пробкой в сухой упаковке. В верхнюю часть суженной части стеклянной трубки с помощью стеклянного стержня помещаем немного стеклянной ваты или ваты из хлопка. Стекло пропускает растворитель, но удерживает абсорбент в колонке, которая располагается вертикально.","type":"unstyled","key":"6ihu5"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"В небольшую часть трубки для установки абсорбента добавляется взвешенное количество абсорбента. Перед использованием колонку промывают элюирующим растворителем. Для защиты поверхности стеклянной трубки кладётся диск из фильтровальной бумаги.","type":"unstyled","key":"bufg5"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Мокрая упаковка при колоночной хроматографии","type":"header-three","key":"eqm68"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"При влажной набивке в колоночной хроматографии стеклянную трубку зажимают вертикально, удерживая её за суженный конец.","type":"unordered-list-item","key":"cbmf3"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Головка пробирки заполнена элюирующим растворителем.","type":"unordered-list-item","key":"cef7d"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Подвижная суспензия абсорбента, приготовленная из элюирующего растворителя.","type":"unordered-list-item","key":"c0llb"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Пробка колонки открывается для оседания абсорбента.","type":"unordered-list-item","key":"da7kh"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Процесс повторяется до тех пор, пока не будет добавлена вся суспензия.","type":"unordered-list-item","key":"6nedu"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Верхняя часть поверхности защищена, так как на неё кладут диск из фильтровальной бумаги.","type":"unordered-list-item","key":"4jdap"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Размещение образца","type":"header-two","key":"9p01r"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Образец, помещённый в колонку, представляет собой либо раствор в растворителе, либо жидкую смесь образца. Если твёрдый образец нерастворим в неполярном растворителе, мы используем полярный растворитель.","type":"unstyled","key":"e9ij0"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Его наливают в небольшое количество адсорбента и помещают в фарфоровую чашку для приготовления густой суспензии. Растворитель полностью выпаривают, помешивая стеклянной палочкой, когда суспензия приобретает пастообразную форму.","type":"unstyled","key":"3g6oe"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Хроматограмма","type":"header-two","key":"2ltu1"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Раствор смеси образцов в подходящем растворителе медленно пропускают через колонку. Когда отдельные компоненты избирательно поглощаются, отображается хроматограмма.","type":"unstyled","key":"7fr0i"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"В процессе колоночной хроматографии это окрашенная или бесцветная полоса или зоны. Таким образом, отдельные окрашенные полосы или зоны разделяются с помощью органических растворителей и собираются в коническую колбу объёмом 25 или 50 мл.","type":"unstyled","key":"bksg7"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[{"key":15,"length":7,"offset":113}],"inlineStyleRanges":[],"text":"Если полосы на хроматограмме бесцветные, вместо стеклянной колонки используется кварцевая. Она помещается в свет ртутной лампы для обнаружения полосы с помощью флуоресценции. Бесцветные соединения также могут быть обнаружены с помощью реагентов, которые окрашиваются в цвет компонентов смеси образцов.","type":"unstyled","key":"bou14"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Разделение методом колоночной хроматографии","type":"header-two","key":"1d148"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Процедура колоночной хроматографии широко используется для разделения,","type":"unstyled","key":"4bc7p"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[{"key":16,"length":6,"offset":12}],"inlineStyleRanges":[],"text":"Нафталин из фенола","type":"ordered-list-item","key":"4pmfi"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Антрацен из пикрата антрацена","type":"ordered-list-item","key":"43uca"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Метиловый оранжевый из метилового синего","type":"ordered-list-item","key":"akr3b"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Пигменты листьев (хлорофилл из каротиноидов)","type":"ordered-list-item","key":"ect66"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"","type":"unstyled","key":"e1nlq"},{"data":{"image":{"id":"6749707c747e837ad0a8d57e"}},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"","type":"atomic:image","key":"dev7p"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Разделение органических соединений","type":"header-three","key":"4fv30"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[{"key":17,"length":17,"offset":250}],"inlineStyleRanges":[],"text":"Колонку из оксида алюминия готовят методом влажной набивки с использованием гексана в качестве растворителя для отделения нафталина от фенола с помощью хроматографической колонки. Фенол хорошо адсорбируется на оксиде алюминия за счёт межмолекулярных водородных связей и хуже растворяется в неполярном гексане.","type":"unordered-list-item","key":"9mltq"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"С другой стороны, нафталин слабо поглощается оксидом алюминия из-за большей растворимости в гексане. Поэтому эти смеси можно легко разделить с помощью хроматографических колонок.","type":"unordered-list-item","key":"5otsp"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Мы также использовали принцип колоночной хроматографии для разделения органических соединений, таких как антрацен и антрацен-пикрилгидрат, а также метиловый оранжевый и метиловый синий.","type":"unstyled","key":"5m7kh"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Пикрат антрацена сильно поглощается колонкой из оксида алюминия, но антрацен поглощается слабо. Аналогично, метиловый оранжевый будет сильно поглощаться из-за наличия группы -SO3H, но метиленовый синий будет поглощаться слабо.","type":"unstyled","key":"cp3q3"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Разделение листовых пигментов","type":"header-three","key":"5r1dt"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Колонку из оксида алюминия готовят методом влажной набивки с использованием растворителя лигроина для разделения пигментов листьев методом колоночной хроматографии.","type":"unstyled","key":"5qpg9"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[{"key":18,"length":11,"offset":50},{"key":19,"length":12,"offset":81}],"inlineStyleRanges":[],"text":"Пигменты листьев содержат в основном хлорофиллы и каротиноиды. Каротиноиды — это углеводороды, содержащие изопреновые группы или их окси- или гидроксипроизводные. Хлорофилл бывает двух типов: хлорофилл-а и хлорофилл-б.","type":"unstyled","key":"dftk"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Каротиноиды — это неполярные соединения, которые слабо поглощаются оксидом алюминия. Поэтому они легко вымываются углеводородными растворителями.","type":"ordered-list-item","key":"b18g7"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Хлорофиллы содержат несколько полярных участков на молекулу. Поэтому они хорошо поглощаются оксидом алюминия и легко вымываются полярным растворителем.","type":"ordered-list-item","key":"43n41"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Колоночная хроматография для очистки белка","type":"header-two","key":"3eull"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Колоночная хроматография — один из наиболее распространённых методов разделения и очистки белков. Как правило, белки представляют собой гибкие аминокислоты с длинной цепью. Они могут быть как гидрофобными, так и гидрофильными, в зависимости от относительного количества содержащихся в них аминокислот.","type":"unstyled","key":"1o4vk"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[{"key":20,"length":19,"offset":80}],"inlineStyleRanges":[],"text":"Для разделения и очистки белков колонка заполняется мелкими шариками, покрытыми ионообменной смолой. Она притягивает гидрофобные аминокислоты к шарикам смолы.","type":"unstyled","key":"37gn0"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Для разделения или очистки многих белков друг от друга с помощью колоночной хроматографии можно использовать ряд растворителей с разной концентрацией.","type":"unstyled","key":"3p1qg"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Аффинная колоночная хроматография","type":"header-two","key":"6takk"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[{"key":21,"length":26,"offset":261}],"inlineStyleRanges":[],"text":"Метод аффинной колоночной хроматографии основан на исключительной способности биологических веществ, таких как белки, специфически и обратимо связываться с другими веществами, называемыми аффинными лигандами. Он используется в основном для очистки и разделения биологических макромолекул.","type":"unstyled","key":"c0jhl"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[{"key":22,"length":12,"offset":101},{"key":23,"length":9,"offset":175}],"inlineStyleRanges":[],"text":"Биологические макромолекулы можно легко высвободить из аффинных комплексов, растворив их или изменив концентрацию растворителя. Такая диссоциация также возможна при изменении уровня pH, температуры и концентрации ионов.","type":"unstyled","key":"dlbj2"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"Выделение, очистка и разделение белка, растяжение, антибиотик и фермент производятся с помощью аффинной колоночной хроматографии.","type":"unstyled","key":"6m39o"},{"data":{},"depth":0,"entityRanges":[],"inlineStyleRanges":[],"text":"","type":"marker","key":"y1WHIRF3A6m8KetlLqrT"}],"entityMap":{"22":{"data":{"href":"https://www.priyamstudycentre.com/2022/05/concentration-calculation-formula.html","url":"https://www.priyamstudycentre.com/2022/05/concentration-calculation-formula.html"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"},"11":{"data":{"href":"https://www.priyamstudycentre.com/2021/08/ethanol.html","url":"https://www.priyamstudycentre.com/2021/08/ethanol.html"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"},"23":{"data":{"href":"https://www.priyamstudycentre.com/2019/09/define-ph-poh-scale.html","url":"https://www.priyamstudycentre.com/2019/09/define-ph-poh-scale.html"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"},"12":{"data":{"href":"https://www.priyamstudycentre.com/2021/08/methanol.html","url":"https://www.priyamstudycentre.com/2021/08/methanol.html"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"},"13":{"data":{"href":"https://www.priyamstudycentre.com/2020/07/water-molecule.html","url":"https://www.priyamstudycentre.com/2020/07/water-molecule.html"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"},"14":{"data":{"href":"https://www.priyamstudycentre.com/2020/09/acetic-acid.html","url":"https://www.priyamstudycentre.com/2020/09/acetic-acid.html"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"},"15":{"data":{"href":"https://www.priyamstudycentre.com/2021/09/mercury-facts.html","url":"https://www.priyamstudycentre.com/2021/09/mercury-facts.html"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"},"16":{"data":{"href":"https://www.priyamstudycentre.com/2021/10/phenol.html","url":"https://www.priyamstudycentre.com/2021/10/phenol.html"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"},"17":{"data":{"href":"https://www.priyamstudycentre.com/2020/03/hydrogen-bonding.html","url":"https://www.priyamstudycentre.com/2020/03/hydrogen-bonding.html"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"},"18":{"data":{"href":"https://www.healthline.com/health/carotenoids","url":"https://www.healthline.com/health/carotenoids"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"},"19":{"data":{"href":"https://www.priyamstudycentre.com/2020/01/hydrocarbon.html","url":"https://www.priyamstudycentre.com/2020/01/hydrocarbon.html"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"},"0":{"data":{"href":"https://www.priyamstudycentre.com/science/analytical-chemistry","url":"https://www.priyamstudycentre.com/science/analytical-chemistry"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"},"1":{"data":{"href":"https://www.priyamstudycentre.com/chemistry/organic-compound","url":"https://www.priyamstudycentre.com/chemistry/organic-compound"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"},"2":{"data":{"href":"https://www.priyamstudycentre.com/2021/11/protein.html","url":"https://www.priyamstudycentre.com/2021/11/protein.html"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"},"3":{"data":{"href":"https://www.priyamstudycentre.com/2021/09/amino-acids.html","url":"https://www.priyamstudycentre.com/2021/09/amino-acids.html"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"},"4":{"data":{"href":"https://www.priyamstudycentre.com/2021/09/enzymes.html","url":"https://www.priyamstudycentre.com/2021/09/enzymes.html"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"},"5":{"data":{"href":"https://www.priyamstudycentre.com/2021/11/chromatography-techniques.html","url":"https://www.priyamstudycentre.com/2021/11/chromatography-techniques.html"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"},"6":{"data":{"href":"https://www.priyamstudycentre.com/2022/06/solvent-definition.html","url":"https://www.priyamstudycentre.com/2022/06/solvent-definition.html"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"},"7":{"data":{"href":"https://www.priyamstudycentre.com/2021/02/calcium.html","url":"https://www.priyamstudycentre.com/2021/02/calcium.html"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"},"8":{"data":{"href":"https://www.priyamstudycentre.com/2018/11/polarity-bonds.html","url":"https://www.priyamstudycentre.com/2018/11/polarity-bonds.html"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"},"9":{"data":{"href":"https://www.priyamstudycentre.com/2022/02/acetone-ch3coch3.html","url":"https://www.priyamstudycentre.com/2022/02/acetone-ch3coch3.html"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"},"20":{"data":{"href":"https://www.priyamstudycentre.com/2021/09/ion-exchange-resin.html","url":"https://www.priyamstudycentre.com/2021/09/ion-exchange-resin.html"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"},"10":{"data":{"href":"https://www.priyamstudycentre.com/2022/02/benzene.html","url":"https://www.priyamstudycentre.com/2022/02/benzene.html"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"},"21":{"data":{"href":"https://en.wikipedia.org/wiki/Macromolecule","url":"https://en.wikipedia.org/wiki/Macromolecule"},"mutability":"MUTABLE","type":"LINK"}}},"mentions":[]}