🔴 ИХТ (иммунохроматографические экспресс-тесты) имеют широкий спектр применения в области лабораторной клинической диагностики и для самостоятельного использования пациентами вне лечебного учреждения в качестве средства самодиагностики неотложных состояний и инфекционных заболеваний.
Изделия находят применение как в качестве инструмента массового текущего скрининга населения, так и в ходе экстренной диагностики, для проведения исследований у постели больного и в полевых условиях.
Что представляет собой ИХТ?
🔴 Взгляд изнутри. Общее строение (рис. 1)
🔺 Основной компонент всех изделий вне зависимости от исполнения и наименования – диагностическая полоска – узкая пластина (2) синтетического материала (пленки), соединенная с адгезивным слоем.
🔺 Поверхность адгезивного слоя закрыта мелкопористой нитроцеллюлозной мембраной (5), вдоль которой проходит латеральный ток жидкости (1), и несколькими различными впитывающими подложками.
🔺 На рабочем конце изделия, предназначенном для нанесения образца, располагаются 2 подложки:
▫️ подложка (3) для конъюгированных с красителем антител (конъюгата); в качестве красителя могут использоваться коллоидное золото, окрашенные полистироловые частицы;
▫️ губчатая подложка для образца (8).
На противоположном конце изделия расположена адсорбирующая подложка (9) для удаления излишней влаги с мембраны. В середине мембраны – промежуточные (7), тестовая (6) и контрольная (4) зоны с фиксированными на них антителами.
🔺 Наличие/отсутствие окрашенных полос в тестовой и контрольной зонах позволяет интерпретировать результаты исследования.
Для дополнительного удобства в применении некоторые типы тестовых полосок могут быть заключены в прочный пластиковый корпус с отверстиями в зоне нанесения образца, а также с окошком в контрольной и тестовой зонах.
🔴 Типы используемых антител (рис. 2):
▫️ антитела, конъюгированные с красителем (А1+К): подвижны, являются моноклональными, высокоспецифичными и уникальными по отношению к исследуемому антигену/антителу;
▫️ антитела тестовой зоны (А2): жестко иммобилизованы, являются моноклональными, специфичными по отношению к исследуемому антигену/антителу;
▫️ антитела контрольной зоны (А3): жестко иммобилизованы, являются антивидовыми, специфичными к моноклональным антителам (А1), предназначены для визуализации правильности протекания реакции.
🔴 Общий принцип действия и интерпретации результатов исследования (рис. 3).
В основе методики лежит принцип тонкослойной хроматографии и общие основы иммунного анализа (взаимодействие антител и антигенов). В результате взаимодействия антигена образца (или антитела крови,выступающего в роли антигена) с антителом теста образуется специфический иммунный комплекс. Свободный образец, непрореагировавший конъюгат, а также образовавшиеся иммунные комплексы движутся вдоль полосы под действием капиллярных сил.
1️⃣ Антигены, в случае присутствия их в образце, вступают в реакцию с моноклональными антителами, меченными сверхчувствительными красителями – коллоидным золотом (конъюгатами) или окрашенными полистироловыми микрочастицами, образуя комплексы «антиген – антитело» (иммунные комплексы).
2️⃣ Иммунные комплексы перемещаются по мембране и вступают в реакцию с иммобилизованными в тестовой зоне поликлональными антителами к антигену.
3️⃣ Если определяемый антиген присутствует в достаточном количестве, окрашенный конъюгат, связанный с антигеном (иммунный комплекс), накапливается в зоне иммобилизации поликлональных антител, образуя окрашенную полосу.
4️⃣ Свободный, не прореагировавший с антигеном конъюгат продвигается по мембране и захватывается иммобилизованными вторичными антителами, нанесенными в контрольной зоне контрольной полосы. Так как при соблюдении всех указаний инструкции по применению свободный избыточный конъюгат обязательно присутствует, в пригодном для применения тесте контрольная зона окрашивается всегда.
Общий принцип – визуализация образующихся диагностических комплексов «антиген – антитело» благодаря массовому скоплению конъюгированных с красителем комплексов в тестовой/контрольной зонах полоски.
Если тест предназначен для одновременной идентификации двух антигенов в пределах одной полоски, необходимо обращать внимание на маркировку тестовых полос (на полоске или кассете) для корректной независимой идентификации каждого антигена. При отсутствии контрольной полосы результат считается некорректным для обоих антигенов.
#лабораторнаядиагностика #медицина #лабораторноеоборудование #микробиология #лаборатория #лабораторныеисследования #ассортимент_гем