А мы продолжаем знакомить вас с материалами вебинара по оборудованию Thermo FS. Более ранние публикации начинаются с 01.06.
Проточный цитометр Attune NxT
Проточный цитометр Attune NxT, используемый в нашей экспериментальной части, представлен в очень хорошей конфигурации – у него произвольно конфигурируемая оптическая система, так что пользователь может заказывать те каналы, которые необходимы.
Большинство каналов здесь уже установлены: можно посмотреть, какие здесь фильтры установлены, но понимая, что вся оптическая система конфигурируется произвольно.
Для примера мы сегодня будем эти светофильтры заменять, чтобы проанализировать цельную кровь, которую при анализе вообще лизировать не будем, а проведем исследование белой крови вместе с эритроцитами. У эритроцитов есть ген, который немного флюоресцирует, если на него фиолетовым лазером посветить, и мы можем таким образом эритроциты по их автофлюоресценции в фиолетовом лазере отделить и анализировать интактную кровь.
Фильтры легко меняются, есть готовые наборы фильтров, есть также просто рамки, которые вы можете купить и в такую рамку вставить вообще любой фильтр.
Слева находится жидкостная часть инструмента, здесь же сток для его отходов. При выполнении исследований на приборе используется проточная жидкость, причем в пересчете на объем образца ее требуется совсем мало.
Например, примерно полтора литра этой жидкости тратится на день активной работы. С учетом того, что прибор может анализировать образцы с очень высокой скоростью – 1000 микролитров в минуту (примерно в 10 раз быстрее, чем у аналогичных других проточных цитометров, присутствующих на рынке), он действительно расходует очень мало реагентов и в целом экономичен.
Если необходимо, вы можете эти банки даже не снимать, а просто взять и долить туда немного проточной жидкости либо каких-то еще других технических жидкостей.
Если какого-то из этих жидких компонентов будет недоставать, прибор об этом сообщит и просто приостановит эксперимент: пользователь должен долить соответствующую жидкость, чтобы продолжить. После долива прибор продолжит выполнение эксперимента с той точки, на которой остановился.
На приборе используется автосэмплер – система автоматической подачи планшетов и образцов. Его удобство заключается в том, что не нужно переключаться между разными типами образцов, и в одном процессе можно одновременно работать и с пробирками, и с цитометрическими «эппендорфиками» (пробирками типа Эппендорф), и также одновременно еще и с планшетом, чтолибо совмещая в нем.
Автосэмплер работает очень быстро, и проводимый нами эксперимент нацелен на то, чтобы показать скорость работы автосэмплера. У него есть различные алгоритмы и методы работы, но сегодня наша цель – продемонстрировать самую высокую скорость – на тысячу микролитров в минуту при небольшом объеме образца.Можно также задать точный режим, при котором прибор будет многократно перемешивать образец, и промываться между образцами.
Чтобы использовать здесь образцы живые или «полуживые», есть охлаждаемые блоки: если такой блок выдержать в холодильнике в течение нескольких часов, он потом в течение очень длительного времени будет сохранять температуру: внутри у него залит этиленгликоль, который очень долго сохраняет температуру, – и исследуемый образец будет охлаждаться. Это важно. Хотя у данного проточного цитометра автосэмплеры быстрые, и потому анализ целого планшета может занять всего 20 минут, но, если исследуются большие объемы образцов и проводится некое долгое исследование, то образец можно охладить.
Полная версия - на сайте