Софья Бунькова - кандидат ветеринарных наук, ветеринарный врач-репродуктолог, г. Новосибирск.
В данной статье рассмотрены современные методы определения фертильного периода и оптимальных сроков вязки у собак: вагинальная цитология, анализ концентрации прогестерона в сыворотке крови, ультрасонография яичников и вагинальная эндоскопия. Дана сравнительная характеристика методов, техника проведения исследований и интерпретация полученных результатов с учетом опыта зарубежных коллег.
Наиболее частая причина обращения к ветеринарному репродуктологу – временное бесплодие сук. Примерно в 70% случаев причиной невозможности собаки забеременеть является неправильное определение фертильного периода и оптимальных сроков вязки (вязка животных на 12–15-й день течки) [2]. При этом фертильный период у каждой особи индивидуален и может наступать как на 7-е, так и на 20-е стуки течки. Поэтому на сегодняшний день актуален вопрос изучения методов определения фертильного периода и оптимальных сроков вязки сук. В этой статье мы рассмотрим наиболее эффективные диагностические способы: вагинальную цитологию, анализ концентрации прогестерона в сыворотке крови, ультрасонографию яичников и вагинальную эндоскопию.
ВАГИНАЛЬНАЯ ЦИТОЛОГИЯ
Наиболее простой и распространенный метод определения фертильного периода – вагинальная цитология. Основной плюс данного исследования – доступность метода. Для исследования мазка достаточно микроскопа и красителей-фиксаторов (краситель по Романовскому, Diff-Quik), которые обеспечивают высокую морфологическую детализацию. Минус метода в операторозависимости, поэтому важно, чтобы цитологию проводил один и тот же специалист на протяжении всего периода исследования суки. Вагинальная цитология не является 100% методом определения фертильного периода, однако позволяет врачу сориентироваться в фазе полового цикла суки. Многие специалисты рекомендуют сочетать этот метод с исследованием сыворотки крови на прогестерон в период, когда результаты вагинальной цитологии соответствует эструсу [6].
Для правильного сбора материала важно соблюдать правила техники проведения исследования. Для снижения дискомфортных ощущений тампон смачивается физиологическим раствором. При входе в свод влагалища тампон необходимо направлять краниодорсально, чтобы избежать контакта с безъядерными клетками, локализованными в клиторальной ямке независимо от стадии полового цикла суки. Нарушение техники забора материала может привести к заведомо ложной интерпретации фазы полового цикла исследуемой пациентки.
Изменение клеточного состава влагалища объясняется изменением концентрации эстрадиола в разные периоды цикла сук. Так в период проэструса эстрадиол стимулирует деление клеток в базальных слоях вагинального эпителия. Поэтому в этот период микроскопическая картина представлена парабазальными и интермедиальными клетками и эритроцитами. Также в эту стадию в мазке можно увидеть митоз клеток (Рис. 1).
Затем, в период позднего проэструса, гормональная стимуляция образования нового, многослойного эпителия снижается, поэтому в образце визуализируется больше интермедиальных клеток, поверхностных клеток с пикнотическими ядрами и поверхностных безъядерных клеток (Рис. 2).
Овуляция происходит через 48 часов после пика лютеинизирующего гормона, снижения эстрадиола и начала повышения прогестерона в сыворотке крови. Примерно в этот период поверхностных клеток становится 80–100% (Рис. 3), что указывает на наступление фертильного периода [5]. Именно в этот момент важно подтвердить полученные результаты исследованием концентрации прогестерона в сыворотке крови.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ПРОГЕСТЕРОНА
Данные о концентрации прогестерона в сыворотке крови являются более точным методом определения фертильного периода сук. Однако не в каждой клинике есть собственный анализатор, определяющий концентрацию прогестерона, что объясняется дороговизной оборудования и расходных материалов, а также низким потоком пациентов, которым необходимы рутинные исследования эндокринных показателей сыворотки крови. Поэтому большинство клиник отправляет образцы в сторонние лаборатории. Прогестерон не является видоспецифичным гормоном, что дает возможность определять его даже в небольших населенных пунктах, не оснащенных отдельными ветеринарными лабораториями.
В начале проэструса прогестерон в сыворотке крови находится на базальном уровне (до 1 нг/мл). К концу проэструса прогестерон демонстрирует динамику повышения и к моменту овуляции показатели достигают 2–4 нг/мл. Через 2-е суток, к моменту созревания ооцитов и началу фертильного периода, показатели соответствуют 6–10 нг/ мл. С начала метэструса концентрация прогестерона продолжает нарастать, достигая максимума (30–90 нг/мл). Высокая концентрация прогестерона в метэструс наблюдается как у беременных, так и небеременных особей. Этим объясняется отсутствие диагностической значимости определения концентрации прогестерона для определения беременности собак [1].
УЛЬТРАСОНОГРАФИЯ ЯИЧНИКОВ
Диагностическая ценность УЗ-метода определения фертильного периода напрямую зависит от уровня подготовки оператора и технических возможностей аппарата. УЗ-исследование яичников проводится линейным датчиком с частотой 7–15 мГц. Данное оборудование позволяет рассмотреть мелкие множественные гипоэхогенные и анэхогенные кистозные структуры в паренхиме парных органов – фолликулы, и отследить сам момент овуляции: уменьшение количества кистозных образований, паренхима становится более однородной, в некоторых случаях может визуализироваться небольшое количество свободной жидкости вокруг органа. Затем в стадию метэструса фолликулы сменяются на желтые тела, вырабатывающие прогестерон, которые на УЗИ выглядят как множественные солидные образования в паренхиме яичников [3].
ВАГИНАЛЬНАЯ ЭНДОСКОПИЯ
Метод основан на изменении васкуляризации и отечности стенок влагалища и изменении цвета и объема транссудата под действием эстрадиола и прогестерона на разных стадиях полового цикла сук. В проэструс слизистая оболочка отечная, васкуляризованная, с красноватым оттенком, между складок визуализируется большое количество кровянистого транссудата. В поздний проэструс, ближе к овуляции, отек уменьшается, цвет слизистой становится спокойно-розовым. Ближе к фертильному периоду цвет слизистой становится бледно-розовым, в некоторых случаях практически белым, транссудат скудный по объему, прозрачный, иногда с небольшим розоватым оттенком. После окончания фертильного периода, в начале метэструса, слизистая оболочка влагалища бледнеет, складки слизистой становятся закругленными. Слизистая в переднем отделе влагалища при прикосновении быстро сжимается, образую «розетку» [4].
Следует отметить, что определение фертильного периода является одним из основных рутинных навыков работы ветеринарного репродуктолога. Важно научиться сочетать основные методы определения оптимальных сроков вязки и разработать конкретную схему обследования в зависимости от оснащенности ветеринарной клиники.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
- Bergeron LH, Gartley CJ. Evaluation of serum hormone measurements in the bitch. In: Proceedings of the 7th International Symposiuim on Canine and Feline Reproduction. Whistler, Canada, 2012
- England G, Concannon PW. Determination of the optimal breeding time in the bitch: basic considerations. In: Recent Advances in Small Animal Reproduction, 2002.
- . England GC, Yeager AE. Ultrasonographic appearance of the ovary and uterus of the bitch during oestrus, ovulation and early pregnancy. J Reprod Fertil Suppl, 1993.
- England GCW, Russo M. Breeding management of the bitch. In: Current Veterinary Therapy XIV. St. Louis, MO: Saunders Elsevier, 2009
- Gillian Simpson, MRCVS.; Gary C W England; Mike Harvey BSAVA manual of small animal reproduction and neonatology. Quedgeley, Gloucester, U.K.: British Small Animal Veterinary Association, 2008
- Robin W Allison, James H Meinkoth Clinical pathology and diagnostic techniques. Philadelphia, Pa., London: Saunders, 2007.
