Одно- или двухлетнее травянистое растение семейства фиалковых, высотой 10-20см, с несколькими стеблями. Стебель простой или ветвистый, олиственный, лежащий, восходящий или прямой. Стеблевые листья очередные, простые, голые, крупногородчатые, продолговато-овальные, прикорневые – почти сердцевидные, на длинных черешках. Прилистники крупные, листовидные, перисто-раздельные. Цветки крупные, со шпорцем; части венчика пестро окрашены: два верхних лепестка фиолетовые, лиловые или синие, два обыкновенных – беловато-желтые, нижний ярко-желтый. Плод – трехстворчатая коробочка. Цветет все лето. Распространена по всей Белоруссии. Растет на свежих почвах на суходольных лугах, на паровых полях, в посевах зерновых, по откосам дорог, в светлых хвойных и смешанных лесах.
С фиалкой трехцветной сходна фиалка полевая, у которой цветки меньше, желтые. Фиалка полевая растет на полях в посевах.
С лечебными целями применяется трава фиалки трехцветной и фиалки полевой. Их собирают в период цветения и сушат в тени. Трава фиалки трехцветной содержит глюкозиды, рутин, виоланин, сапонины, танины, витамин С, слизь, В-каротин.
В научной медицине трава фиалки трехцветной в виде настоя применяется как отхаркивающее средство при трахеите, бронхите.