Лизис клеток является важным этапом экстракции и дальнейшей очистки внутриклеточных белков. Метод, используемый для лизиса клеточной стенки, может в значительной степени влиять на успешность и воспроизводимость последующих приложений. Исследуемый белок может теряться на каждом этапе экстракции и очистки, поэтому необходимо выбрать наиболее оптимальный метод разрушения клеточной стенки, позволяющий получить максимально возможный выход и чистоту белка.
Набор для экстракции бактериального белка, НЭББ, diaGene более эффективен, чем традиционная обработка ультразвуком и приготовленные в лаборатории буферы для лизиса, многие из которых содержат детергенты и компоненты, мешающие последующим применениям.
НЭББ это готовый к использованию реагент для лизиса клеток, представляющий собой раствор на основе неионогенных детергентов , которые эффективно разрушают клетки и солюбилизируют нативные или рекомбинантные белки без денатурации. Детергент входящий в состав НЭББ создает отверстия в клеточной мембране, освобождая цитозольные белки и бактериальную хромосому.
После высвобождения хромосомы, раствор может стать вязким, что затрудняет последующую очистку бактериального белка. В этом случае рекомендуется добавить бензонуклеазу к реакционной смеси для снижения вязкости раствора. Для лучшей эффективности лизиса и при наличии телец включения рекомендуем добавить лизоцим к реакционной смеси.
Более подробную информацию вы можете получить здесь.