Индикаторы, меняющие свой цвет при изменении рН среды, используют не только для определения реакции среды. Их вводят также в состав специальных сред, которые служат для выявления биохимических свойств микробов. Изменение цвета среды указывает на образование кислоты или щелочи при ферментативной деятельности микробов.
Более удобны двухцветные индикаторы, имеющие разную окраску в кислой и щелочной среде. Лакмусовая настойка, например, при кислой реакции приобретает розовую окраску, при щелочной - синюю. Часто применяют розоловую кислоту, которая в кислой среде - до рH 6,2-6,5 - имеет желтую окраску, а начиная от pН 6,5 приобретает бледно-розовый цвет, переходящий в интенсивно-розовый при щелочной реакции (начиная от рН 7,2).
Способы приготовления некоторых индикаторов.
Розоловая кислота. Этот индикатор применяют в виде спиртово-водного раствора: 0,1 г розоловой кислоты растворяют в 10 мл чистого спирта, а затем добавляют 70 мл дистиллированной воды.
Индикатор Андреде: кислого фуксина 1 г, дистиллированной воды 400 мл, раствора едкого натра 64 мл. После приготовления сутки выдерживают в термостате, 2 сут на свету. В кислой среде краснеет.
Индикаторы Кларка (см.таблицу).
Готовят в виде спиртовых и водных растворов. Спиртовые растворы (1,6%) используют при приготовлении специальных питательных сред. Для определения реакции применяют водные растворы, так как они более чувствительны, чем спиртовые. Для приготовления водного раствора 0,1 г индикатора в порошке перетирают в ступке с 1/20 N раствором едкого натра. Разные индикаторы растворяют в разных количествах едкого натра:
для фенолового красного требуется 5,7 мл,
для метилового красного - 7,4 мл,
для крезолового красного - 5,3 мл,
для бромкрезолового красного - 3,7 мл,
для бромтимолового синего - 3,2 мл,
для тимолового синего - 4,3 мл.
После растворения добавляют воды до 25 мл и получают 0,4% основные растворы, которые способны долго храниться.