В прошлой статье мы рассмотрели, какие есть тесты на антитела к коронавирусу и что они могут нам сказать. Во второй части рассмотрим, как работают тесты, чтобы получить результат. Существует несколько типов тестов на антитела, различающиеся по точности и времени, которое требуется для получения результатов. Ниже мы рассмотрим основные категории и то, как они работают.
Быстрые диагностические тесты (RDTs)
Это так называемое экспресс-тестирование. Быстрые диагностические тесты для коронавируса работают по аналогии с домашним тестом на беременность (но вам не нужно на них мочиться ). Они могут функционировать несколькими различными способами, но ниже следует простое описание общего метода.
Образцом для такого типа тестов будет являться кровь (из пальца), слюна или образец, взятый с помощью носового тампона. Образец добавляется на один конец тест-полоски и, поднимаясь по ней вверх, проходит через область, содержащую инактивированный вирус. Если ваш образец содержит антитела к вирусу, они свяжутся с ним, поднимая его и пронося вверх по тестовой палочке. Вирус помечен наночастицами золота, которые играют важную роль в создании результата.
По мере того, как образец продолжает свое путешествие вверх по тест-полоске, он достигает линий теста. Эти линии содержат фиксированные антитела, которые захватывают ваши антитела (если они есть), а также вирус и золотые наночастицы, к которым они прилипают. Золото имеет красный цвет в форме наночастиц, и это приводит к появлению красной линии в тестовой зоне. Если у вас нет антител к вирусу в вашем образце, фиксированным антителам нечего захватить, то тестовая линия не становится красной.
RDTs обычно имеет 2 линии: одна для антител IgM и одно для антител IgG. Там также будет контрольная линия, которая использует контрольные антитела, содержащиеся на тест-полоске, чтобы проверить, что тест работает правильно. Если контрольная линия становится красной, тест работает правильно. если это не так, нужно переделать тест снова с другой тест-полоской.
RDTs-это самый быстрый тест на антитела, но их результаты очень ограничены. Они могут только сказать нам, присутствуют ли антитела в образце. Они не могут сказать, сколько антител присутствует или насколько эффективны наши антитела против вируса.
RDTs также являются одними из наименее точных тестов на антитела. Когда речь заходит о коронавирусе, чувствительность некоторых тестов RDTs может варьироваться в пределах 34-80%. В первой части статьи (Биологическая химия: Что могут сказать нам тесты на антитела? Часть 1) мы говорили, что чувствительность теста показывает, как часто он правильно дает положительный результат для того, у кого есть антитела. Таким образом, чувствительность 34% довольно низкая: если бы 20 человек с антителами прошли тест, только 7 были бы правильно идентифицированы как имеющие антитела.
Анализы нейтрализации
В отличие от RDTs, анализы нейтрализации являются лабораторными тестами. Они занимают до 5 дней,и это самый длительный из всех анализов на антитела, рассмотренных здесь. Однако задержка идет с пользой: они могут сообщить нам информацию об антителах пациента, которую не может дать ни один из других тестов.
Чтобы провести анализ на нейтрализацию, ваш образец крови будет разбавлен в разной степени. Затем эти различные разведения смешивают с постоянной концентрацией вирусной суспензии, инкубируют и добавляют к исходным клеткам в чашке Петри. Покрытые агаром, образцы в чашках инкубируют в течение нескольких дней.
За это время участки инфицированных клеток (бляшки) разрастаются. Антитела к вирусу в образце пациента уменьшат образование бляшек. Сравнивая результаты при различных разведениях образца пациента, можно определить, насколько эффективны антитела к вирусу в вашем образце. Это полезно знать, так как эффективность антител может варьироваться. Если у вас есть антитела, но они не особенно эффективны, вы все равно можете снова заразиться вирусом в будущем.
Фермент-связанные иммуноабсорбентные анализы (ИФА)
Это еще один лабораторный тест. Как RDTs и анализы нейтрализации, он может сказать, присутствуют ли антитела к вирусу в вашем образце. Кроме того, этот тест может дать представление об уровнях антител в вашем образце, что может быть важным фактором в будущем иммунитета. Есть несколько небольших вариаций этого теста – но в этой статье сосредоточимся на "непрямом" методе.
Непрямой ИФА включает добавление образца пациента к микропланшету, обильно покрытому деактивированным вирусом или вирусным белком. Любые антитела в вашем образце будут связываться с ними, когда содержимое микропластинки инкубируется.
Затем добавляются ферментно-меченые антитела. Эти антитела связываются с антителами пациента. После этого добавляют вещество, которое связывается с ферментом (субстрат). При этом изменяется цвет, когда он связывается с ферментом, причем интенсивность цвета напрямую связана с количеством антител в образце пациента. Итак, чем больше антител в вашем образце, тем интенсивнее цвет. Если вы не имеете антитела, то никакое изменение цвета не произойдёт.
Такие тесты обычно занимают несколько часов. В основном они имеют более высокую чувствительность и специфичность, чем RDTs, что означает меньшее количество ложноотрицательных и ложноположительных результатов. Несколько тестов также могут быть выполнены одновременно. Однако они не дают информации об эффективности антител в вашем образце.
Другие иммуноанализы
Существует ряд различных тестов иммуноанализа, которые работают аналогично ИФА, но имеют некоторые заметные различия.
Например, при хемилюминесцентном иммуноанализе вместо изменяющих цвет субстратов используются люминесцентные (светопроизводящие) субстраты. Количество производимого света пропорционально уровню антител в вашем образце.
Вариант его, электрохемилюминесцентный анализ, маркирует антитело с подложкой, которая производит свет, когда применяется электрический ток. Опять же, уровень производимого света пропорционален уровню антител в вашем образце.
Итак, вы взяли тест на антитела
Если вы сделали тест на антитела к коронавирусу и получили результат, что это значит? Если был получен отрицательный результат теста, это значит, что антител к SARS-CoV-2 обнаружено не было. Значит ли это, что у вас точно никогда не было этой болезни? Невозможно быть уверены на 100%, потому что всегда есть небольшой риск ложноотрицательного результата.
То же самое верно, если у вас положительный тест, т.е., что у вас есть антитела к болезни. Опять же, всегда есть небольшой риск ложноположительного результата. Даже если результат верен, никто не знает наверняка, что наличие антител определенно предотвратит вас от повторного заражения болезнью, или, даже если они это произойдёт, как долго этот иммунитет может длиться.
Спасибо за проявленный интерес, уважаемые читатели! Ставьте лайки и подписывайтесь на канал! Будьте здоровы!