Эхокардиография
Эхокардиографию проводили до введения дозы нагрузки трастузумаба и в конце периода исследования для групп 1e3. Эхокардиографические исследования проводили с помощью GE-Vivid i и зонда 7 МГц (GE, Милуоки, штат Висконсин, США) с кроликами, слегка успокоившимися для минимизации рестрикционно-индуцированного стресса. Протокол седации состоял из ацепромазина 1 мг/кг подкожно. Для каждого эхокардиографического исследования использовался один и тот же протокол седации. Три электрокардиографических провода были размещены на ногах. Параостральные виды были получены с помощью кроликов, размещенных в правом и левом боковых углублениях, а также с помощью зонда, расположенного под краниальным углом в области бритья на нижней части грудной стенки. Точное положение датчика было скорректировано по мере необходимости для получения стандартных взглядов. Кролики оценивались путем выполнения правой и левой парастернальной двухмерной (2D) и М-модовой эхокардиограмм. Эхокардиографические измерения как в 2D, так и в M-модовых эхокардиограммах были получены в виде правой параостральной оси. Они включали интерферикулярную толщину и толщину левого желудочка в диастоле и систоле, а также внутренний диаметр левого желудочка в конце диастоле (LVIDd) и концевой систоле (LVIDs). Внутренний диаметр левого желудочка и толщина стенок были измерены по двухмерным целевым M-режимным эхокардиографическим трассировкам в короткой параостральной оси. Измерения диаметра корня аорты и левого предсердия были получены по 2D изображениям в основании сердца, от короткой оси, правого параострального вида. Затем было рассчитано отношение левого корня предсердия к корню аорты. Систолическую функцию оценивали с помощью дробного укорочения левого желудочка (ЛЖ), дробных изменений в области короткоосевой камеры ЛЖ (фракции укорочения области) и фракции выброса. Дробное укорочение было вычисляется с помощью уравнения [(LVIDd e LVIDs)/LVIDd] * 100%. Формула для дроби укорачивания области была [(Aread e Areas)/Прочитать] * 100%, а доля выброса была рассчитана по формуле Симпсона. Пульс постоянно регистрировался во время каждого исследования. Допплеровское изображение митрального и аортального клапанов было получено с апикальной 4-камерной и апикальной 5-камерной точек зрения соответственно. Были получены три измерения каждого параметра и усреднены для статистического анализа. Во время сбора и анализа эхокардиографических данных кардиолог был ослеплен групповым заданием для всех испытуемых.
Для сравнения были использованы ранее опубликованные значения средней доли выброса (59,03% / 8,30%) и соотношения пиковой скорости кровяного потока у ранней диастолы (волна Е) и пиковой скорости кровяного потока у ранней диастолы от сокращения предсердий (волна Е/А) (1,80 ± 0,54) у самцов новозеландских белых кроликов (Пелоси). Для данного исследования отсечение для нормали было установлено на одно стандартное отклонение ниже опубликованного среднего, или 50,73% для LVEF и 1,26e2,34 для E/A.
Анализ данных
Описательный анализ и t-тестирование для сравнения между группами были завершены с использованием SAS/STAT 14.3. Размер выборки был выбран для пилотного исследования, а не для того, чтобы показать статистически значимые различия между группами.
Утверждение этических норм
Исследование было одобрено Комитетом по этике и уходу за животными Мичиганского государственного университета Ani- mal Use, который предоставляет как этические рекомендации, так и разрешение на уход за животными. Протокол был внедрен в аккредитованном исследовательском центре ani- mal use с обученным персоналом и ветеринарным контролем.
Результаты
Кролики без происшествий переносили добавки селена и трастузу-мабовую терапию. Повторных действий на месте инъекций не было. Одно животное из 3-й группы было исключено из анализов на отклонение протокола, оно получило менее 6 мг/кг трастузумаба в четвертой и пятой дозах.
Уровни селена
Средний базовый уровень селена в сыворотке крови колебался от 149 до 178 нг/мл, при этом самые низкие уровни наблюдались в 3-й группе. Средний уровень селена в сыворотке крови после приема добавки составил 187-198 нг/мл; уровни для 3-й группы, получавшей добавку селена, были аналогичны уровням двух других групп. По результатам исследования уровень селена в сердечной ткани был самым высоким в 3 и 4 группах (табл. 1).
Гистопатология
Результаты приведены в таблице 2. В группе 1 морфологические изменения не выявлены. Во 2-ой и 3-ей группах наблюдались легкие межсердечные и периваскулярные изменения лимфоцитов и макрофагов. Во 2-й группе отмечен редкий апоптоз, а в 3-й - редкий миофибриллярный некроз.
продолжение следует...