Продолжение
3.4. Опосредованное Rg1 метилирование, образующее соединения, такие как диметил-гистон H3K9
Диметил-гистон Х3К9 ковалентно доработанный гистон, который эпигенетическая отметка сильно связанная с транскрипционной репрессией. Богатые повторами области конститутивного гетерохроматина обогащены диметилированием и триметилированием гистона 3 лизина 9 (H3K9me2 и H3K9me3). Для определения связи между СД и метилированием мы изучили степень метилирования (Рис.1). 5). Инъекция СТЗ приводила к снижению экспрессии H3K9me как в поджелудочной железе, так и в печени, как показано на фиг. 5 А и В. По сравнению с группами STZ, Rg1 способствовал метилированию H3K9 (поджелудочная железа и печень; P < 0.05). Репрезентативные изображения Западного пятна H3K9me в этих органах были увеличены, как показано на фиг. 5. Денситометрический анализ H3K9me также показан ниже.
3.5. Rg1 снижает уровень воспаления NLRP3 в поджелудочной железе и печени
Поскольку NLRP3 и IL-1β тесно связаны с воспалительными механизмами, что также является главным предметом настоящего исследования, были проведены Western blot и иммуногистохимический анализ. Денситометрический анализ содержания NLRP3 и IL-1β представлен на Рис.2. 5 С и D. репрезентативные изображения Western blot NLRP3 и IL-1β показаны на Рис.2. 5 С и D.
Для подтверждения вышеизложенных данных мы использовали иммуногистохимический анализ для выявления родственных белков, и полученные результаты согласуются с Western blot. Rg1 понижал экспрессию NLRP3 и связанную с этим гиперэкспрессию IL-1β, как показано на Рис.2. 5 лечение E. STZ вызывало избыточную экспрессию NLRP3 в поджелудочной железе и печени, по сравнению с контрольной группой ( P < 0,001), как показано на Рис.2. 5 E. После введения Rg1 повреждение, индуцированное СТЗ, значительно уменьшилось, о чем свидетельствует более светлая коричневая масса клеток печени ( P < 0.05). Однако повреждение СТЗ и терапевтический эффект Rg1 в поджелудочной железе были не столь заметны, как в печени. Однако, что касается Ил-1β, то эти изменения стали гораздо более выраженными ( Рис.2). 5F). Экспрессия IL-1β достоверно повышалась ( Р < 0,001), но Rg1 снижал высокую экспрессию, наблюдаемую в модельной группе (Р В поджелудочной железе уровень Ил-1β повышался после лечения СТЗ на фиг. 5 Ф ( Р < 0,05), а также уменьшилось после введения Рг1 ( Р
3.6. Rg1 отрегулировал путь Keap1/Nrf2/HO-1 в модели мыши DM
Keap1/Nrf2 / HO-1 является важным путем в метаболических заболеваниях. Наши результаты показали, что Rg1 способствует ядерной транслокации Nrf2 ( рис. 6 а), в то время как он ускорял транспорт Keap1 обратно в цитоплазму ( рис. 6 Б). Наблюдения за нисходящим потоком Nrf2 показали, что СТЗ вызывает увеличение содержания HO-1 и NQO1 в качестве механизма обратной связи ( Рис.2). 6 C), между тем GCLC и GCLM ( рис. 6 г).
Таким образом, СТЗ индуцировали повреждение клеток в различных органах, что вызвало воспаление, связанное с активацией воспаления NLRP3 и снижением экспрессии H3K9me. Rg1 регулировал функцию пути Keap1/Nrf2 / HO-1 при антиоксидантном стрессе. Нисходящий поток Nrf2 также регулировался Rg1, действующим против окислительного стресса (рис. 7).