Добавить в корзинуПозвонить
Найти в Дзене
Владимир Краснов

Гинзенозид Rg1 защищает мышей от стрептозотоцин-индуцированного диабета типа 1 путем модуляции NLRP3 и Keap1/Nrf2/HO-1 путей

Продолжение 3. Результаты 3.1. Rg1 отрегулировало уровни глюкозы в крови и улучшило диабетические симптомы Химическая структура Rg1 показана на фиг. 1. До введения СТЗ достоверной разницы в уровне глюкозы крови между группами не было выявлено ( Рис.2). 2 А-Б). В краткосрочном экспериментальном периоде масса тела мышей значительно уменьшилась после введения СТЗ (данные не показаны). Инъекция СТЗ повышала уровень глюкозы в крови мышей как в краткосрочной, так и в долгосрочной группах ( P Как показано на фиг. 2 а–в, пероральное введение 10, 20 и 40 мг / кг массы тела Rg1 снижало ненормальные уровни глюкозы крови, особенно в группах низких доз в краткосрочных тестах ( P < 0.01), демонстрируя свое благотворное влияние на гомеостаз глюкозы. Суточное наблюдение за выделениями мышей показало, что по сравнению с группами, получавшими СТЗ, введение Rg1 и SP могло облегчить симптомы избыточного выделения мочи, как показано на Рис.2. 2 C-D. Скачать: Скачать high-res image (97KB)
Скачать: Скач
Оглавление

Продолжение

3. Результаты

3.1. Rg1 отрегулировало уровни глюкозы в крови и улучшило диабетические симптомы

Химическая структура Rg1 показана на фиг. 1. До введения СТЗ достоверной разницы в уровне глюкозы крови между группами не было выявлено ( Рис.2). 2 А-Б). В краткосрочном экспериментальном периоде масса тела мышей значительно уменьшилась после введения СТЗ (данные не показаны). Инъекция СТЗ повышала уровень глюкозы в крови мышей как в краткосрочной, так и в долгосрочной группах ( P Как показано на фиг. 2 а–в, пероральное введение 10, 20 и 40 мг / кг массы тела Rg1 снижало ненормальные уровни глюкозы крови, особенно в группах низких доз в краткосрочных тестах ( P < 0.01), демонстрируя свое благотворное влияние на гомеостаз глюкозы. Суточное наблюдение за выделениями мышей показало, что по сравнению с группами, получавшими СТЗ, введение Rg1 и SP могло облегчить симптомы избыточного выделения мочи, как показано на Рис.2. 2 C-D.

Скачать: Скачать high-res image (97KB)
Скачать: Скачать полноразмерное изображениеИнжир. 1. Химические структуры гинзенозида Rg1.

 2. Rg1 регулирует уровень глюкозы в крови и улучшает диабетические симптомы у мышей СД. Rg1 регулировал у мышей (а) кратковременное изменение уровня глюкозы в крови и (с)экскреты, в то время как у мышей (Б) долговременное изменение уровня глюкозы в крови и (Г) экскреты изменяются. Данные представлены в виде среднего ± S. E. M. из 10 мышей в каждой группе. ### P < 0,001 против ctrl; * P < 0,05, * * P < 0,01, * * * P < 0,001 против STZ.
2. Rg1 регулирует уровень глюкозы в крови и улучшает диабетические симптомы у мышей СД. Rg1 регулировал у мышей (а) кратковременное изменение уровня глюкозы в крови и (с)экскреты, в то время как у мышей (Б) долговременное изменение уровня глюкозы в крови и (Г) экскреты изменяются. Данные представлены в виде среднего ± S. E. M. из 10 мышей в каждой группе. ### P < 0,001 против ctrl; * P < 0,05, * * P < 0,01, * * * P < 0,001 против STZ.

3.2. Rg1 снижает воспалительное воздействие и уровень АЛТ и АСТ в сыворотке крови

Предыдущие исследования ( Gao et al., 2015, 2016) показали, что Rg1 эффективен против окислительного стресса, а также оказывает противовоспалительное действие. Во-первых, мы нашли белки, которые были тесно связаны с воспалением (NLRP3) и окислением (Nrf2), используя базу данных STRING ( https://string-db.org/ ), как показано на фиг. 3 A-B. использование RCSB PDB ( http://www.rcsb.org/ ), мы получили трехмерные структуры NLRP3 и Keap1 / Nrf2 для дальнейших исследований ( рис. 3 C-D). Во-вторых, мы обнаружили экспрессию воспалительных факторов IL-1β и IL-18 через ИФА. Как показано на фиг. 3Э-Ф, введение СТЗ достоверно влияло на экспрессию воспалительных факторов, тогда как лечение Рг1 обращало вспять состояние гиперэкспрессии воспалительного фактора по сравнению с группами СТЗ (Рг1-10, P < 0,05; Рг1-40, P В то же время Rg1 снижал избыточную экспрессию IL-18 в краткосрочных и долгосрочных тестах (Rg1-10, вещество P, P < 0,05; Rg1-20, Rg1-40, вещество P, P

3. Rg1 снижает воспалительные факторы IL-1β и IL-18, а также АЛТ и АСТ. А) сетевая структура NLRP3 (воспаление). B) сетевая структура Nrf2 (окисление). (C, D) белковые структуры NLRP3 и Keap1/Nrf2. Е) Ил-1β. F) ИЛ-18. G) ИНС (в качестве инсулина). H) иммуногистохимический анализ окрашивания инсулином: ctrl, STZ, Rg1-40 и SP. Оригинальное увеличение × 400. Процентное содержание инсулиноположительных клеток в островках. Rg1 также понижает уровни ALT и AST в (I) краткосрочных и (J) долгосрочных группах. Данные представлены в виде среднего ± S. E. M. из 6 мышей в каждой группе. # P < 0,05, # # P < 0,01, # # # P < 0,001 против ctrl; * P < 0,05, * * P < 0,01 против СТЗ.
3. Rg1 снижает воспалительные факторы IL-1β и IL-18, а также АЛТ и АСТ. А) сетевая структура NLRP3 (воспаление). B) сетевая структура Nrf2 (окисление). (C, D) белковые структуры NLRP3 и Keap1/Nrf2. Е) Ил-1β. F) ИЛ-18. G) ИНС (в качестве инсулина). H) иммуногистохимический анализ окрашивания инсулином: ctrl, STZ, Rg1-40 и SP. Оригинальное увеличение × 400. Процентное содержание инсулиноположительных клеток в островках. Rg1 также понижает уровни ALT и AST в (I) краткосрочных и (J) долгосрочных группах. Данные представлены в виде среднего ± S. E. M. из 6 мышей в каждой группе. # P < 0,05, # # P < 0,01, # # # P < 0,001 против ctrl; * P < 0,05, * * P < 0,01 против СТЗ.

СТЗ может уменьшить или разрушить секретирование инсулина путем разрушать поджелудочную железу β-клетка; поэтому, изменения в уровнях инсулина сыворотки также были измерены. Результаты показали, что Rg1 может значительно увеличить количество высвобождаемого инсулина ( рис. 3 г). СД может индуцировать повреждение печени и повышать концентрацию АЛТ и АСТ ( Peng et al., 2019).По сравнению с контрольными мышами, уровни АЛТ и АСТ у модельных мышей значительно повышались после индуцированного сахарным диабетом введения СТЗ ( Рис.2). 3H ang 3I). Rg1 снижал уровни АЛТ и АСТ после лечения как в краткосрочной, так и в долгосрочной группах.

3.3. Rg1 аттенуированное stz-индуцированное повреждение клеток, исследованное методом окрашивания H&E

Rg1 значительно облегчал СТЗ-индуцированную деструкцию панкреатической и печеночной клеточной архитектуры, что было отмечено методом окрашивания гематоксилином и эозином (H&E) (Рис.2). 4). В группах длительной терапии протективные эффекты Rg1 наблюдались в поджелудочной железе мышей во всех дозированных группах (Рис.1). 4 А–С). В клетках поджелудочной железы и печени контрольной группы заметных изменений не наблюдалось. В модельной группе после введения СТЗ вакуолизировали центрилобулярные и перипортальные гепатоциты (Рис.2). 4Б-Г). Наблюдалось набухание клеток печени, бледная цитоплазма и нечеткие цитоплазматические границы. В резком контрасте, по сравнению с контрольной группой, Rg1 обратило stz-индуцированное повреждение в клетках печени в модельной группе, как показано на фиг. 4 Б–д. Соответственно, СТЗ-индуцированное повреждение при СД представлено сначала в печени, а затем в поджелудочной железе, что позволяет предположить, что в рамках метаболизма печень впервые сталкивается с токсикантом. Между тем, по сравнению с модельными группами, обработка мышей контрольной группы Рг1 достоверно подавляла степень повреждения, вызванного СТЗ.

 4. Защитное действие Rg1 на печень и поджелудочную железу мышей оценивали на срезах, окрашенных H&E. (A, B) краткосрочные группы (поджелудочная железа и печень): ctrl, STZ, Rg1-10 и SP. (C, D) долгосрочные группы (поджелудочная железа и печень): ctrl, STZ, Rg1-40 и SP. Оригинальное увеличение × 200. Данные были представлены в виде среднего ± S. E. M. из 6 мышей в каждой группе.
4. Защитное действие Rg1 на печень и поджелудочную железу мышей оценивали на срезах, окрашенных H&E. (A, B) краткосрочные группы (поджелудочная железа и печень): ctrl, STZ, Rg1-10 и SP. (C, D) долгосрочные группы (поджелудочная железа и печень): ctrl, STZ, Rg1-40 и SP. Оригинальное увеличение × 200. Данные были представлены в виде среднего ± S. E. M. из 6 мышей в каждой группе.