Пониженная регуляция остеопонтина ингибирует потемнение белых жировых тканей через PI3K-AKT путь у мышей C57BL / 6. Продолжение

3.5. Влияние пониженной регуляции ОПН на метаболизм глюколипидов и накопление липидов в печени

Как показано на фиг. 5, уровни ФПГ, тг, ТК, инсулина, HOMA-IR и резистина в группе ГФД были выше, чем в группе нормы, и разница была достоверной ( Р < 0,05 или Р В нормальной группе, по сравнению с Ctrl или подгруппой транспортных средств, все эти параметры не смогли заметно увеличиться в подгруппе sh-OPN. Однако в группе ГФД лечение sh-ОПН достоверно повышало все эти показатели по сравнению с подгруппой "ожирение" или "ожирение + транспорт" (Р < 0,01) (Рис.2). 5нота Фа). Кроме того, результаты окрашивания маслом red O также показали, что лечение sh-OPN усиливало накопление липидов, индуцированное HFD в печени ( Рис.2). 5 г). В целом, полученные данные свидетельствуют о том, что снижение уровня ОПН ухудшило нарушение глюколипидного обмена, вызванное ГФД, либо во всем организме, либо в печени.

5. Влияние пониженной регуляции ОПН на метаболизм глюколипидов и накопление липидов в печени. Группировка и обработка мышей была такой же, как описано на фиг. 3. Были выявлены следующие показатели: глюкоза плазмы крови натощак (ФПГ) (а), триглицериды (тг) (в), общий холестерин (ТС) (с), инсулин (D), HOMA-IR (е), резистин(F) и накопление липидов в печени (G). Данные были выражены в виде среднего ± SD, n = 5, * P < 0,05, * * P < 0,01, по сравнению с контрольной группой; # # P Масштаб бар: 50 мкм.

3.6. Влияние пониженной регуляции OPN на уровни экспрессии PGC-1α, PRDM16 и UCP-1 в WAT

После инфицирования Ad-GFP-aP2-OPN-shRNA были подготовлены парафиновые срезы из IWAT, и in situ экспрессии PGC-1α, PRDM16 и UCP-1 были обнаружены иммуногистохимией. Полученные результаты показали, что уровни экспрессии PGC-1α, PRDM16 и UCP-1 в группе ГФД были достоверно снижены по сравнению с таковыми в нормальной группе. В нормальной группе уровни экспрессии PGC-1α, PRDM16 и UCP-1 в подгруппе sh-OPN были даже ниже, чем в подгруппе Ctrl или подгруппе транспортных средств; в группе HFD аналогичные результаты были получены между подгруппами ( Рис.2). 6С). Эти результаты свидетельствуют о том, что ОПН-даунрегуляция ингибирует экспрессию in situ молекулярных маркеров БА.

6. Влияние пониженной регуляции OPN на уровни экспрессии PGC-1α, PRDM16 и UCP-1 в WAT. Группировка и обработка мышей была такой же, как описано на фиг. 3. Уровни PGC-1α (A), PRDM16 (B) и UCP-1 (C) были определены иммуногистохимией в IWAT. Масштаб бар: 50 мкм. IWAT: паховая белая жировая ткань.

3.7. Влияние пониженной регуляции OPN на уровни экспрессии PI3K, AKT-pS473, AKT и PPARy в WAT

Различные исследования показали, что PI3K-AKT-PPARy путь участвует в WAT-browning. Соответственно, мы окончательно рассмотрели уровни экспрессии PI3K, AKT-pS473, AKT и PPARy методом western blotting. Как и ожидалось, наши результаты показали, что при нормальном Чоу, OPN downregulation значительно снижал уровни экспрессии PI3K, AKT-pS473 и PPARy. В добавлении, HFD также заметно уменьшило уровни всех этих протеинов; сверх того, OPN downregulation ускоряло ход уменшений наведенных HFD. Вместе взятые, полученные данные показывают, что ингибирование WAT-browning, вызванное OPN-downregulation, вероятно, связано с подавлением PI3K-AKT-PPARy пути ( Рис.2). 7 A-D).

Эффекты снижения регуляции OPN на уровнях экспрессии PI3K, AKT-pS473, AKT и PPARy в WAT. Группировка и обработка мышей была такой же, как описано на фиг. 3. Уровни экспрессии PI3K (A, B), AKT-pS473 (A, C) и PPARy (A, D) в IWAT были обнаружены методом western blotting. Данные были выражены в виде среднего ± SD, n = 5, * P < 0,05, * * P < 0,01, по сравнению с контрольной группой; # # P IWAT: паховая белая жировая ткань.

4. Обсуждение

Браунинг Ват стал точкой притяжения исследования и терапевтическим кандидатом на ожирение и связанные с ним метаболические заболевания из-за сжигания жира и производства тепла ( Choe et al., 2016). Кроме того, как эндокринный орган, летучая мышь высвобождает разнообразные адипокины, которые регулируют другие ткани и органы для поддержания системного метаболического гомеостаза ( Poher et al., 2015; Yang et al., 2015). Таким образом, летучие мыши играют положительную роль в контроле и лечении ожирения и связанных с ним метаболических заболеваний ( Poher et al., 2015; Schrauwen et al., 2015). В прошлом считалось, что количество летучих мышей в организме человека постепенно уменьшается с возрастом и практически отсутствует у взрослых. Однако многие исследования подтвердили существование активных летучих мышей у взрослых с помощью фтордезоксиглюкозной позитронно-эмиссионной томографии ( ФДГ-ПЭТ) (Cypess et al., 2009; Cypess et al., 2015; Saito et al., 2009; van Marken Lichtenbelt et al., 2009). Таким образом, это звучит значимым для изучения летучих мышей и Браунинг Ват у людей. В 2008 году Цзэн и его коллеги обнаружили, что BMP7 может способствовать дифференцировке коричневых адипоцитов ( Tseng et al., 2008). OPN, как гомолог с BMP7 и хорошо установленным маркером в процессе остеогенеза, может индуцировать дифференцировку преадипоцитов 3T3-L1 в коричневые адипоциты, что было подтверждено в нашем предыдущем исследовании ( Zhong et al., 2015). Кроме того, Chen et al. установлено, что блокирование функции OPN способствует адипогенной дифференцировке мезенхимальных стволовых клеток и ингибирует остеогенную дифференцировку ( Chen et al., 2014). Тем не менее, многие исследования показали, что ОПН высоко выражен у тучных людей, и что ОПН играет важную роль в ожирении и хроническом воспалении, но его точные роли и механизмы до сих пор неизвестны. В этом исследовании мы исследовали влияние OPN на Wat-Браунинг и лежащие в его основе механизмы в экспериментах in vivo, специально понижая уровень OPN в WAT. Наши настоящие результаты демонстрировали downregulation OPN блокируют коричневеть WAT через ингибитирование тропа PI3K-AKT-PPARy.