NO опосредует влияние синтетического натрийуретического пептида NPCdc на почки и аорту у нефрэктомированных крыс

Продолжение 8

3.8. NPCdc не активирует изоформы NOS в грудной аорте

Поскольку как нефрэктомия, так и NPCdc воздействовали [NO 2 – ] на грудную аорту, были исследованы уровни общего eNOS и nNOS и фосфорилирование активационных участков eNOS Ser−1177 и nNOS Ser−1417 ( Рис.2). 7). Кроме того, нефрэктомия увеличивает экспрессию iNOS, чтобы усугубить воспаление в аорте ( Aiello et al., 1997). Поражение сосудов способствует прогрессированию хронической болезни почек. Поэтому был исследован p-iNOS Tyr−151 ( рис. 7). Соотношение p-eNOS Ser−1177 /eNOS (рис. 7 А) была увеличена в группе 5/6Nx, в то время как общая экспрессия eNOS ( рис. 7 Б) был сокращен (29%, р < 0.01) в 5/группа 6Nx относиться с транспортного средства. Несмотря на то, что соотношение p-eNOS Ser−1177 /eNOS было увеличено у крыс в группе 5/6Nx, eNOS был расцеплен, о чем свидетельствует соотношение димер/мономер ( Рис.2). 7 С). NPCdc не повлиял на соотношение p-eNOS Ser-1177 /eNOS ни в одной группе. В группе 5 / 6Nx также были представлены более высокие уровни ( 58%, P < 0,001) p-iNOS Tyr−151 (Рис.2). 7 г). Уровни p-nNOS Ser-1417 /nNOS были одинаковыми во всех группах, в то время как общие уровни nNOS были увеличены в группе sham, обработанной NPCdc ( рис. 7 е и F, соответственно).

7. Уровни белков NOS в грудной аорте после инфузии физиологического раствора или NPCdc. (A) соотношение p-eNOS Ser−1177 /eNOS, (B) общие уровни eNOS, (C) соотношение eNOS димер/мономер, (D) уровни P-iNOS Tyr−151, (E) p-nNOS Ser-1417соотношение /nNOS и (F) общие уровни nNOS показаны. Репрезентативные иммуноблоты показаны над соответствующими гистограммами. Группы sham и 5 / 6Nx подвергались непрерывной внутривенной инфузии транспортного средства (физиологический раствор, 100 мкл/кг/мин) или NPCdc (7,5 мкг/кг/мин) в течение 70 мин непосредственно перед забором грудной аорты. Данные представлены в виде средних ± S. E. M., n = 5-7 различных выборок. Результаты были проанализированы с помощью двухсторонней ANOVA с последующим тестом множественных сравнений холма-Сидака. ** P < 0,01 и * * * P < 0.001: и Шам. Денситометрическая оценка всех пятен была количественно и статистически воспроизведена во втором измерении.

3.9. NPCdc увеличивает уровни p-ERK1/2 Thr−202/Tyr−204 , но не p-AKT Ser−473

Уровни p-AKT Ser-473, total AKT, p-ERK1/2 Thr-202 / Tyr-204 и total ERK1 / 2 были проанализированы в грудной аорте для изучения компонентов ниже NPR-C и выше изоформ NOS ( Рис.2). 8). Соотношение p-AKT Ser-473 /AKT было одинаковым между группами ( рис. 8 а), в то время как общий уровень акт был снижен (на 27%, Р < 0,01) в группе 5/6нх, независимо от лечения ( Рис.2). 8 Б). NPCdc достоверно увеличило соотношение p−ERK1/2 Thr−202 /Tyr-204/ERK1/2 как в группе sham, так и в группе 5 / 6Nx (68% и 46% соответственно, P < 0,001, рис. 8 С). С другой стороны, общие уровни ERK1 / 2 были аналогичны между группами.

8. Уровни белков AKT и ERK1/2 в грудной аорте после инфузии физиологического раствора или NPCdc. А) коэффициент P−AKT Ser-473 /AKT, B) общий уровень AKT, с) p-ERK1 / 2 Thr-202 / Tyr-204Показано соотношение ERK /ERK, (D) общий уровень ERK1/2 и (E) репрезентативные иммуноблоты. β-актин служил регулятором нагрузки. Группы sham и 5 / 6Nx подвергались непрерывной внутривенной инфузии транспортного средства (физиологический раствор, 100 мкл/кг/мин) или NPCdc (7,5 мкг/кг/мин) в течение 70 мин непосредственно перед забором грудной аорты. Данные представлены в виде средних ± S. E. M., n = 7 или 8 выборок. Результаты были проанализированы с помощью двухсторонней ANOVA с последующим тестом множественных сравнений холма-Сидака. * P < 0,05: против sham; # # P