NO опосредует влияние синтетического натрийуретического пептида NPCdc на почки и аорту у нефрэктомированных крыс

Продолжение 7

3.5. NPCdc снижает почечный окислительный стресс в группе 5 / 6Nx за счет снижения активности НАДФН-оксидазы

Влияние нефрэктомии и NPCdc на базальные и NADPH-стимулированные уровни O2 •– показано на Рис.2. 4. В группе 5/6Nx наблюдалось 2-кратное увеличение базальных уровней O 2 • по сравнению с группой sham ( Рис.1). 4 а). Кроме того, активность НАДФН-оксидазы также была повышена (131%, P < 0,05) в группе 5/6Nx по сравнению с группой sham ( Рис.2). 4 Б). NPCdc снизил активность НАДФН-оксидазы (на 26%, P < 0,05) в группе 5/6Nx ( Рис.2). 4 Б); однако базальные уровни O2 • - не изменились ( рис. 4 а). С другой стороны, NPCdc не влиял на базальные или NADPH оксидазозависимые уровни O2 •– в почках группы sham (Инжир. 4 А и Б).

Скачать: Скачать high-res image (129KB) Скачать: Скачать полноразмерное изображениеИнжир. 4. А ) уровень базального супероксидного аниона (O 2•–) и B) активность НАДФН-оксидазы в почках после инфузии физиологического раствора или Нпцдк. Группы sham и 5 / 6Nx подвергались непрерывной внутривенной инфузии транспортного средства (физиологический раствор, 100 мкл/кг/мин) или NPCdc (7,5 мкг/кг / мин) в течение 70 мин непосредственно перед удалением почек. Данные представлены в виде средних ± S. E. M., n = 6-8 различных выборок. Результаты были проанализированы с помощью двухсторонней ANOVA с последующим тестом множественных сравнений холма-Сидака. *** P < 0,001: против sham; # # P

3.6. NPCdc модулирует активность ферментов Na + / K + - АТФазы и Na + - АТФазы в проксимальных канальцах

Активность Na + / K + - АТФазы была снижена (на 45%, р < 0,001) в группе 5/6Nx по сравнению с группой sham ( Рис.2). 5 а), в то время как активность Na + -АТФазы оставалась неизменной ( рис. 5 Б). NPCdc снижал активность Na + /K + - АТФазы (на 23%, P < 0,05) в группе Шам ( Рис.2). 5 А) и повышали активность Na + -АТФазы (47% и 64%, р < 0,05 соответственно) как в группе Шам, так и в группе 5/6нх ( Рис.2). 5 Б).

Скачать: Скачать high-res image (121KB) Скачать: Скачать полноразмерное изображениеИнжир. 5. А) активность Na + / K + - АТФазы и B) активность Na + -АТФазы в проксимальных канальцах почек после инфузии физиологического раствора или Нпцдк. Группы sham и 5 / 6Nx подвергались непрерывной внутривенной инфузии транспортного средства (физиологический раствор, 100 мкл/кг/мин) или NPCdc (7,5 мкг/кг / мин) в течение 70 мин непосредственно перед удалением почек. Данные представлены в виде средних ± S. E. M., n = 6 или 7 различных выборок. Результаты были проанализированы с помощью двухсторонней ANOVA с последующим тестом множественных сравнений холма-Сидака. *** P < 0.001: против sham; # # P < 0.01 и ### P

3.7. NPCdc decreases NADPH oxidase activity, increases NO bioavailability and increases cGKI levels in the thoracic aorta in the 5/6Nx group

Влияние нефрэктомии и NPCdc на НАДФН-зависимые оксидазозависимые уровни O2 •– показаны на фиг. 6 A. нефрэктомия привела к увеличению в 1,4 раза продукции НАДФН-оксидазы-стимулированной О2 •– в грудной аорте по сравнению с Шам аортой. NPCdc аттенуировали (42%, P < 0,05) НАДФН-оксидазу– стимулированную продукцию О2 • - в аортах из группы 5/6Nx. С другой стороны, NPCdc не влиял на активность НАДФН-оксидазы в группе sham ( Рис.2). 6 а).

6. А) активность НАДФН-оксидазы, Б) концентрация нитритов [NO 2–]и (C) уровни белка cGMP-зависимой протеинкиназы I (cGKI) в грудной аорте после инфузии физиологического раствора или Нпцдк. Группы sham и 5 / 6Nx подвергались непрерывной внутривенной инфузии транспортного средства (физиологический раствор, 100 мкл/кг/мин) или NPCdc (7,5 7,5 мкг/кг/мин) в течение 70 мин непосредственно перед забором грудной аорты. Репрезентативные иммуноблоты для cGKI и β-актина показаны над гистограммами в (C). Данные представлены в виде средних ± S. E. M., n = 6-8 различных выборок. Результаты были проанализированы с помощью двухсторонней ANOVA с последующим тестом множественных сравнений холма-Сидака. * P < 0,05, * * P < 0.01 и * * * P < 0.001: против sham; # P < 0.05, # # P < 0.01 и ### P

Для определения уровня NO в грудной аорте использовали концентрацию нитрита [NO 2–] (Рис.1). 6 Б). Образцы грудной аорты из группы 5 / 6Nx содержали меньше [NO 2 -] (71%, P NPCdc увеличился [NO 2 – ] в группах sham и 5 / 6Nx (66% и 166% соответственно, P

Поскольку NO активирует sGC для выработки цГМФ, а основной мишенью цГМФ является цгки, были измерены уровни белка цгки в грудной аорте. Уровень белка cGKI был снижен (48%, P < 0,001) в аортах из группы 5/6Nx ( Рис.2). 6 С). Напротив, NPCdc только увеличил уровни cGKI (82%, P