Рак желудка признан одним из наиболее распространенных видов рака. Китай является одним из самых распространенных регионов рака желудка в мире, и механизм патогенности остается неясным. На сегодняшний день хирургические вмешательства, являющиеся основным выбором для лечения рака желудка, являются терапевтическими менее чем в 40% случаев, поскольку пациенты с раком желудка обычно диагностируются на терминальных стадиях. Поэтому необходимы методы ранней профилактики и диагностики рака желудка. Рак желудка образуется последовательно, в несколько этапов, при которых метаплазия и дисплазия кишечника идентифицируются как предраковые поражения желудка. Углубленные исследования GPL могут дать новый взгляд на предотвращение возникновения рака желудка. Возникающие исследования показали, что аэробный гликолиз, означающий образование раковыми клетками большого количества лактата независимо от наличия кислорода, приводит к развитию рака желудка. Существует высокая вероятность того, что аномальный гликолиз возникает в GPL и для стимуляции GPL был выбран N-метил-нитро-N-нитрозогуанидин.
Гликолиз признан одной из отличительных черт рака, поэтому предполагается, что в GPL происходит аномальный гликолиз. Лактатдегидрогеназа А - фермент, катализирующий последнюю стадию гликолиза, - была представлена в виде гиперэкспрессии в различных типах рака и опухолей. Сверхэкспрессия ЛДГК способствует прогрессированию рака желудка. Перепроизводство и внутриклеточное накопление лактата, приводящее к гибели опухолевых клеток, может быть экспортировано путем экспрессии коэффициентов транспортеров монокарбоксилата 4. Кроме того, тенденция экспрессии LDHA и MCT4 опосредована гипоксическим индуктивным фактором-1α. Следовательно, возможно, что ингибирование экспрессии LDHA может быть жизненно важным моментом в предотвращении GPL. Сигнализационный путь PI3K-Akt-mTOR участвует в регуляции аэробного гликолиза. В этом сигнальном пути активация PI3K может вызвать экспрессию Акта, который является регулируемым уровнем mTOR. mTOR может регулировать HIF-1α для опосредованного клеточного метаболизма. Следует также отметить, что подавитель опухоли miRNA-34 способен опосредовать экспрессию сигнального пути LDHA и PI3K/Akt.
Материалы и методы
1. Материалы и животные
В общей сложности 60 самцов Sprague-Dawley крыс в возрасте 4-6 недель, вес 180-200 г были получены из Гуандунской медицинской лаборатории животноводческого центра. У крыс SD слабое заболевание желудка, подобное GPL, вызывалось сочетанием раствора MNNG в течение 200 мг/л и кормлением каждые две недели в течение 26 недель. 50 Крысы потребление MNNG были использованы в качестве модельной группы и 10 крыс были случайным образом разделены на нормальную группу, которые были введены регулярно. На 16-й неделе модельная группа, включая модельную группу, положительную, высокую дозу WPX и низкую дозу WPX. После лечения в течение 10 недель всех крыс гуманно эвтаназировали натриевым пентобарбиталом после 12-часового голодания, и немедленно удаляли желудок.
2. Гистологическое окрашивание
Желудочная ткань была собрана и зафиксирована в 10% нейтрально-буферном формалине в течение 12 ч. Затем образцы были обезвожены спиртом и ксилолом соответственно. После обезвоживания образцы помещали в парафин. Последовательные разрезы были получены из желудка и окрашены гематоксилином и эозином и высокожелезиновой алмазно-алкийской синепериодической кислотой-Schiff с использованием стандартных методов наблюдения гистологических изменений слизистой желудка и типов метаплазии кишечника.
3. Анализ вестерн-блота
Белки выделяли методом SDS-PAGE и переносили в нитроцеллюлозные мембраны. В течение ночи мембраны измеряли соответствующими антителами. Впоследствии вторичное вторичное антитело IgG конъюгированного пероксидазой козьего кролика или козьего антимышиного хрена.
4. Иммуногистохимия
Метод стрептавидинпероксидазы использовался для исследования экспрессии ЛДГВ в слизистой оболочке желудка. Анти-LDHA антител был разбавлен в 1:200, и комплект иммуногистохимии SP был приобретен у MAXIM.
Гистологический анализ
Основным подходом к оценке степени поражения слизистой оболочки желудка было проведение гистологических наблюдений. На 8-й неделе появление диффузного вакуолярного поражения указывает на метаплазию слизистой оболочки желудка кишечника, в то время как метаплазия кишечника с рассеянной диспластической клеткой произошла на 12-й неделе.
В отличие от контрольной группы, можно отметить, что толщина подвальной мембраны была более асимметричной в модельной группе. Кроме того, в слизистой оболочке распространялись эпителиальные эпителиальные клетки желудка с увеличенными, гиперхроматическими и перенаселенными ядрами. Выведен дифференцированный размер эпителиальных клеток и слияние полостей слизистой оболочки желудка. Аномалия эпителиальной дисплазии желудка проявилась в слизистой оболочке желудка. Метаплазия и дисплазия кишечника в определенной степени улучшили в положительной группе.