Папиллярная карцинома щитовидной железы (ПТК) является наиболее распространенной злокачественной опухолью эндокринной системы и наиболее распространенным видом рака щитовидной железы. Хотя прогноз для ПТК относительно хорош, рецидив или метастаз лимфатических узлов все еще наблюдается примерно у 32% пациентов, проходящих лечение только хирургическим путем, а частота рецидивов достигает 38,5%-60% у пациентов с метастазами лимфатических узлов. ПТК не сопровождается легко различимыми симптомами и подвержен постановке неправильного диагноза или отставанию в диагностике. Поэтому очень важно выявить факторы риска и механизмы, влияющие на ход выполнения ПТК.
Для ликвидации йододефицитных заболеваний около 70% мирового населения в настоящее время потребляет йодированную соль. Это ставит большинство людей в адекватное или передозировочное состояние по отношению к йоду. За последние 30 лет спектр заболеваний щитовидной железы также претерпел значительные изменения, такие как заболеваемость гипотиреозом, субклиническим гипотиреозом и аутоиммунным тиреоидитом, причем все они значительно возросли. Однако уровень сывороточного тиреоидстимулирующего гормона и частота аутоиммунного тиреоидита были тесно связаны с диагнозом ПТК. Поэтому очень важно изучить влияние йода на ПТК. Подавляющее большинство йода, необходимого организму человека, поступает из пищи, и любой избыток выделяется в основном через почки. Показатели выделения и потребления йода примерно одинаковы. Уровень йода в моче в основном отражает потребление йода при стабильном метаболизме. Медианный йод мочи - это идеальный показатель для измерения состояния питания населения йодом.
1. Предметы исследования
72% с патологическим диагнозом операции на щитовидной железе были отобраны во Вторую филиальную больницу Харбинского медицинского университета. Все испытуемые проживали в своих домах более 10 лет и не покидали это место за две недели до этого. Критериями исключения были коронарная ангиография, эндоскопическая ретроградная холангиопанкреатография, расширенная компьютерная томография и другие йодные контрацептивы за последние 6 месяцев, беременные женщины, больные диабетом, больные с нарушением функции почек и использование амиодарона, пероральных контрацептивов в течение трех дней после тестирования, и те, кто не ел норийные препараты Кр.
2. Клеточные линии
Была использована линия клеток BCPAP, которая является линией клеток ПТК человека, несущей мутацию BRAFV600E, из Медицинского университета Лион-Суд, Франция. Это было четвертое поколение клеток. Она была сертифицирована в качестве ячейки БЦПАП путем повторного короткого тандемного подтверждения биотехнологии Сайбайкана. Испытания на микоплазму были проведены на клеточной линии. Клетки культивировались с 5 мл среды клеточной культуры: 89% среды 1640, 10% специальной сыворотки плода крупного рогатого скота и 1% раствора пенициллина-стрептомицина при 37°C в 5% инкубаторе CO2. Клеточную культуральную среду заменили каждые два дня.
3. LC3-II и анализ каспазы-3
Связанный с аутофагией белок LC3-II и связанная с апоптозом каспаза-3 в раковых тканях ПТК были обнаружены иммуногистохимическим окрашиванием. Первый день включал депарафинизацию образцов тканей, инкубацию кусочков парафина на ночь в духовке при температуре 80 °C и дважды замачивание в ксилол в течение 10 минут каждый, затем последовательное замачивание в безводном состоянии 95%, 90%, 85% и 80% этанола в течение 5 минут с последующим промыванием. Блокировка включала 3% Н2O2-активированную эндогенную пероксидазу. Удаление антигена заключалось в помещении кусочков на металлическую пятнистую решетку, которая затем выдерживалась в кипящей воде, содержащей этилендиамминовую тетрауксусную кислоту, перед инкубацией при 121 °C и 15 psi в автоклаве в течение 10 минут. Затем кусочки были доведены до комнатной температуры и промыты. Затем кусочки помещали во влажную камеру, добавляли герметичный сывороточный альбумин, а слайды инкубировали в течение 20 минут при комнатной температуре. После удаления раствора тюленя были добавлены первичные антитела и инкубированы в течение ночи при температуре 4°С. На второй день температура инкубации была повышена до 37 °C. Секции были вытерты и помещены во влажную камеру. Добавлено вторичное антитело. Для окрашивания, секции были вымыты, вытерты и помещены на деревянный блок. После инкубации в 3,3'диаминобензидине секцию наблюдали с помощью микроскопа. Когда положительные клетки были окрашены, но фон оставался не закрашенным, секция быстро погружалась в фосфатно-буферный солевой раствор для прекращения окрашивания. Затем секцию окрашивали гематоксилином для визуализации ядер. Затем секции обезвоживали 80%, 85%, 90% и 95% безводного этанола в течение 3 минут каждый, затем замачивали в ксилоле в течение 5 минут, прежде чем ксилол был заменен и замочен в течение 5 минут, после чего запечатывали горку и крышку скольжения с помощью нейтральной резинки. Затем кусочки выдерживали в течение ночи в печи при температуре 80°C.
