Рита (Маргарита) Гладунко родилась в 1929 году в городе Усмань.
С 20-ти лет Рита стала выступать на сцене Бердичевского драматического театра. Через два года ее пригласили работать в драматический театр в городе Тернополь.
В 1953 году переехала в Минск и ее пригласили стать актрисой Минского драматического театра имени Максима Горького. На сцене Рита всегда блистала в образах жен, матерей и работниц. С 1956 года она перешла в Белорусский академический театр имени Янки Купалы.
В 1955 году талантливая актриса дебютировала в фильме Сплошнова и Шульмана "Зеленые огни".
После выхода этой картины ее сразу же утвердили на роль в фильме "Наши соседи", в котором режиссер Сплошнов постарался показать жизнь соседей по коммунальной квартире.
Популярность и узнаваемость к Гладунко пришла после выхода советской картины "Часы остановились в полночь" в 1958 году, в котором она исполнила роль разведчицы. Этот фильм основан на реальных событиях Великой Отечественной войны.
Именно за роль разведчицы Марины Казинич, Рита Гладунко стала лауреатом в номинации "Приз за лучшую женскую роль" на Всесоюзном кинофестивале.
В 1960 году актриса также исполнила главную роль в советском фильме "Весенние грозы".
В 1961 году Рита снялась в образе Марины в картине "Гулящая" по мотивам произведения Панаса Мирного.
В 1970-е и 1980-е годы актриса в основном снималась в эпизодах, главных ролей у не больше не было: "Строговы", "Подозрительный", "Еще не вечер", "Утро", "Огарева, 6" и многих других.
Личная жизнь актрисы была переполнена романами и браками. Она была очень влюбчивой и любвеобильной натурой.
В 1947 году Рита Гладунко родила дочь Людмилу, которая стала актрисой и женой популярного актера Бориса Токарева.
Первый раз актриса вышла замуж за кинооператора Андрея Булинского, в браке у них родилась дочь Надежда. Булинский был старше Гладунко на 19 лет, но это ее совсем не смущало, она безумно его любила. Дочь называла его отцом. Но все же пара развелась из-за измены супруга.
Второй раз Рита вышла замуж за режиссера и сценариста Николая Фигуровского в 1959 году. Дочки актрисы его хорошо приняли, он занимался их воспитанием. Именно он предложил ей главную роль в фильме "Часы остановились в полночь", которая стала знаковой в ее творчестве.
Но вскоре актриса влюбилась в режиссера Петра Тодоровского и ушла от законного супруга. Они проживали вместе в гражданском браке, Тодоровский по-настоящему ее любил. Тодоровский всю жизнь помнил о Рите Гладунко, хотя она его и отвергла. После этого романа она снова вернулась к Фигуровскому, он ее безоговорочно принял.
Но спустя некоторое время, Рита влюбилась в артиста Виктора Авдюшко и оставила Фигуровского. Ему очень трудно дался этот развод.
Виктор Авдюшко ее обожал, но не смог побороть свою страсть к спиртным напиткам, актриса ушла от него.
Также она была замужем за доктором экономических наук Геннадием Хромушиным. Прожив в браке шесть лет они развелись и Хромушин женился на актрисе Наталье Кустинской.
Последние годы своей жизни актриса проживала у своей младшей дочери в Лиссабоне. В 1996 году Рита приехала в Москву к старшей дочери. Но в день отъезда она ушла из жизни.