Церковь во имя Знамения Пресвятой Богородицы располагается вдали от шумной автомагистрали – у западных ворот городского вала, в недалеком соседстве со Свято-Никольским монастырем. Нынешняя церковь, украшенная снаружи мозаикой, построена совсем недавно по архитектурным мотивам ХVII столетия. Она была построена в 1998 -начале 2000-х годов переславским предпринимателем А.Г.Громыко, на его средства и на пожертвования, собранные прихожанами. Место для возведения храма было выбрано не случайно. Её предшественница – Знаменская церковь имела многовековую историю. Этот храм был связан со многими царственными особами - супругой Дмитрия Донского Евдокией и ПетромI. И сейчас в нем создан придел, освященный в память последнего российского императора Николая II и его супруги Александры Федоровны.
По преданию, именно здесь находилась деревянная церковь, заложенная княгиней Евдокией, супругой Дмитрий Донского. Ее постройкой она хотела отметить свое чудесное спасение во время нашествия на Переславль войск крымского хана Тохтамыша в 1382 году, в этом уголке Переславля она смогла ускользнуть от преследований. Событие это произошло в день, когда церковь отмечала рождество Иоанна Предтечи – 7 июля по новому стилю. И новый деревянный храм был освящен в честь этого праздника.
С 1628 на этом месте стояла церковь в честь Рождества Иоанна Предтечи. Эта церковь существовала ещё в начале XVI века и упоминается в житии преподобного Даниила. Она напоминает о себе приделом к церкви. Во время Петра Великого и после него, церковь Знамения имела прозвище «при кораблях». Недалеко от церкви была верфь, на которой строилась Переславская флотилия, а позднее здесь на берегу хранились корабли.
В 1788 году вместо этой деревянной церкви «вкладчицей вдовой майоршей Анной Ивановой Масловой» построен каменный храм. Престолов в церкви было два: в холодной в честь Знамения Пресвятой Богородицы, в тёплом приделе в честь Рождества Иоанна Предтечи.