Найти тему
Ветеринар

Работа с бруцеллами в лаборатории

Оглавление

Принципы биозащиты

Задача всякой системы биозащиты – обеспечить биоизоляцию, т. е. не допустить попадания возбудителей за пределы определенного пространства, что предусматривает три принципа работы с инфекционным материалом:

1. Безопасные приёмы работы

  • Строгое соблюдение правил стандартной практики и методик работы в микробиологической лаборатории
  • Работники должны быть тщательно обучены, твёрдо знать правила обращения с возбудителями и хорошо владеть соответствующими навыками

2. Безопасные помещения

  • Вторичный барьер, элементами которого являются средства обеззараживания /деконтаминации (автоклав), вентиляционные системы особой конструкции, зоны с особым режимом доступа и т. п.

3. Безопасное оборудование

  • Шкафы I, II и III классов биозащиты, центрифуга с защитными стаканами, средства индивидуальной защиты (СИЗ), т. е. перчатки, халаты, накидки, чехлы для обуви, бахилы, респираторы, щитки для лица, защитные очки.

Уровни биозащиты

Существуют четыре уровня биозащиты (BSL) – четыре режима, применять которые следует при работе с возбудителями опасных заболеваний человека. Каждой уровень представляет собой определенное сочетание приёмов и методик лабораторной работы, защитного оборудования и средств защиты лабораторных помещений:

  • BSL-1
  • BSL-2
  • BSL-3
  • BSL-4

1-ый уровень биозащиты (BSL-1)

Представляет собой базовый режим биоизоляции, применямый при работе с известными, хорошо изученными штаммами, не вызывающими заболевания здоровых взрослых людей. Режим BSL-1 включает следующие элементы:

  • когда идёт эксперимент, вход в рабочее помещение ограничен;
  • работа с возбудителями ведётся в лабораторном халате и перчатках;
  • перед тем, как покинуть рабочее помещение, следует мыть руки;
  • в рабочем помещении запрещается принимать пищу, пить (даже чай, кофе или воду) и курить;
  • не всасывать материал в пипетку ртом (пользоваться только механическими приспособлениями);
  • все культуры и соответствующие предметы и материалы
    перед отправкой в отходы автоклавируются;
  • на входе в рабочее помещение вешается знак «опасные биоматериалы»
-2

2-й уровень биозащиты (BSL-2)

Применяется при работе умеренно опасными возбудителями заболеваний человека в крови и отделяемом организма, когда угроза образования аэрозоля незначительна

  • Персонал лаборатории должен пройти обучение приёмам работы с конкретными возбудителями у опытных специалистов;
  • Режим ограниченного доступа в рабочее помещение;
  • Предусматриваются специальные емкости для зараженных острых предметов;
  • Для работы с инфекционными аэрозолями предусматриваются шкафы биозащиты или иные средства физической изоляции.
-3

-4

3-й уровень биозащиты (BSL-3)

Предназначен для работы с местными и экзотическими возбудителями, способными передаваться воздушно-капельным путем и создавать серьезную угрозу для здоровья

  • Персонал лаборатории должен пройти особую подготовку у опытных специалистов;
  • Все без исключения работы с возбудителями ведутся в шкафах биозащиты;
  • Работа ведётся только в защитной одежде и других штатных СИЗ;
  • Во время выполнения экспериментов двери в рабочее помещение должны быть закрыты;
  • Проводится иммунизация работников к соответствующим возбудителям, работников обследуют на наличие в возбудителей их организме;
  • Перед работой у лабораторных и прочих работников, подверженных риску заражения, берётся на анализ сыворотка;
  • В доступном месте должно находиться руководство по технике безопасности, составленное с учетом специфики конкретной лаборатории.
-5

4-й уровень биозащиты (BSL-4)

Предусмотрен для работы с опасными и экзотическими крайне контагиозными возбудителями, вызывающими опасные для жизни человека заболевания, причем средства иммунизации и лечения этих заболеваний отсутствуют

  • Рабочее помещение должно находиться либо в отдельном здании, либо в режимной зоне внутри здания;
  • Вся работа ведётся только в шкафах III класса биозащиты;
  • Работать следует в цельном индивидуальном скафандре с избыточным давлением и поддувом воздуха, вентилируемом системой жизнеобеспечения;
  • Рабочее помещение должно быть оборудовано конструктивными средствами, препятствующими попаданию возбудителя во внешнюю среду.
-6

Уровни биозащиты при работе с отдельными возбудителями инфекционных заболеваний

1  a) Khan et al. The Lancet, 2000, 356, 1179–1182 (Sep 30)      b) Klietmann, Ruoff. Clinical Microbiology Reviews, 2001, 14 (2), 364–381
2 Санитарные правила (быв. СССР): СП 1.3.1285–03, СП 1.2.731–99
3 Режим BSL-2 для пат. материала и BSL-3 для выделенного микроорганизма
1 a) Khan et al. The Lancet, 2000, 356, 1179–1182 (Sep 30) b) Klietmann, Ruoff. Clinical Microbiology Reviews, 2001, 14 (2), 364–381 2 Санитарные правила (быв. СССР): СП 1.3.1285–03, СП 1.2.731–99 3 Режим BSL-2 для пат. материала и BSL-3 для выделенного микроорганизма

Сводная таблица рекомендуемых уровней биозащиты (BSL) для работы с возбудителями

-8

Работа с возбудителем. Бруцеллы

Род Brucella включает медленно растущих очень мелкие грамотрицательных коккобацилл, вызывающих инфекции двух типов:

1. Профессиональные заболевания

  • Известны случаи заражения работников лабораторий воздушно-капельным путем
  • Воздушно-капельный путь заражения в помещениях для скота (стойлах, конюшнях и т. п.)
  • Случайное самозаражение вакцинными штаммами

2. Заражение естественным путем

  • Бруцеллез – зоонозное заболевание
  • Передается всевозможными путями

– Прямой контакт с зараженными животными

–Употребление зараженного молока (в т. ч. грудного) и молочных
продуктов

–Внутрибольничное заражение медработников от больного во время
хирургической операции

Лабораторное заражение бруцеллами

  • При заражении воздушно-капельным путем или подкожно инфекционная доза бруцелл для лабораторных животных составляет 10–100 клеток
  • Большинство случаев лабораторного заражения происходит в научных учреждениях из-за того, что работа с возбудителем ведётся прямо на открытых столах, работники нюхают чашки с культурой или неправильно обращаются с культурой бруцелл при массовом выращивании
  • Заражение вследствие образования аэрозоля из культур взятого у животных заразного патологического материала (крови, отделяемого, тканей) или при попадании его на кожу
  • Бруцеллы заражают кровь и самые разные ткани: ликвор, семя, отделяемое легких, плаценту

Рекомендации по биоизоляции бруцелл

-9

Оценка риска заражения бруцеллёзом

1. Когда в лаборатории происходит аэрозольный выброс бруцелл, риску подвергаются все, кто находился в помещении*

2. Экстренное профилактическое лечение (ЭПЛ)

  • Доксициклин (100 мг перорально дважды в день) + рифампин (600 мг перорально раз в день) в течение трёх недель
  • Беременным прежде чем принимать какие бы то ни было лекарственные препараты следует обратиться за консультацией к наблюдающему их врачу

3. Дальнейшее наблюдение за состоянием контактировавших с бруцеллой лабораторных работников

  • Дважды в день мерить температуру на протяжении 4 недель
  • Более общие симптомы бруцеллёза на протяжении 6 месяцев
  • Острая форма: лихорадка, озноб, головные боли, ломота в пояснице
  • Подострая форма: поты, недомогание, мышечные боли, лихорадка
  • Хроническая форма: потеря аппетита, потеря веса, боли в животе

*Материал заимствован из статьи в MMWR от 18янв2008(т.57,№2,с.39–42)

Дополнительные рекомендации по ЭПЛ

Рекомендованное ЭПЛ контактировавших с B. abortus RB51 (устойчивый к рифампину ослабленный вакцинный штамм) отличается от ЭПЛ контактиро-вавших с полностью патогенными бруцеллами:

  • Доксициклин (100 мг перорально дважды в день) в течение как минимум трёх недель
  • При наличии противопоказаний к приёму доксициклина можно давать триметоприм

Эпиднаблюдение по бруцеллезу

Рекомендации по эпиднаблюдению

  • Выяснить, сколько работников подверглось воздействию возбудителя, и в зависимости от числа отнести ЧП к высокой или низкой степени риска
  • Взять сыворотку вначале и в дальнейшем (через 2, 4, 6 недель и через 24 недели) на титр антител (определяется реакцией агглютинации)
  • Организовать регулярное (еженедельное) активное наблюдение за развитием лихорадочных заболеваний
  • Рекомендовать ЭПЛ

Работа с факторами риска

-10

Рекомендуемый дополнительный материал в интернете

http://www.cdc.gov/OD/ohs/biosfty/bmbl4/bmbl4s3.htm

http://www.cdc.gov/mmwr/preview/mmwrhtml/mm5702a3.htm

http://bmbl.od.nih.gov/intro.htm

http://www.stimson.org/cbw/pdf/CTS-Chapter4.pdf

http://www.usamriid.army.mil/education/bluebookpdf/USAMRIID%20Blue%20Book%205th%20Edition.pdf


Иллюстрации: Баха