Птицы, использованные в данном исследовании, были рассмотрены в соответствии с Канадским советом по уходу за животными, и все процедуры были одобрены Комитетом по уходу за животными Гельфского университета (Протокол об использовании животных № 1946). Все штаммы, представленные в настоящем документе, были анонимизированы в соответствии с требованиями генных компаний, которые передали в дар родительские запасы.
Родительские запасы: Руководство
В общей сложности 2600 оплодотворенных яиц пяти штаммов материнского поголовья были предоставлены двумя коммерческими генетическими компаниями (коричневая 1 и белая 1 от компании 1; коричневая 2 и белая 2 от компании 2; каждая компания предоставила 360 яиц женского пола и 64 яйца мужского пола на каждый штамм), а также птицеводческой исследовательской станцией Аркелльского университета Guelph. Чтобы гарантировать подобный опыт, яйца от всех штаммов были собраны у бабушек и дедушек в возрасте от 40 до 50 недель. Яйца и птенцы подвергались одинаковым условиям инкубации и содержания, как описано выше. Птенцы были обвязаны крыльями в вылупливании, и каждый штамм был равномерно распределен на 4 родительские стаи, которые были размещены в 2 комнатах, содержащих 10 загонов по 27 птиц (24 самки и 3 самца). Загоны (3,7 м2) были обогащены сосновыми стружками, один приподнятый окунь и один нижний окунь, общая площадь которых составляла 12,8 см/птица/ручка. В 18 недель к каждому из загонов было пристроено по пять гнездовых коробок. Птенцы из разных загонов были визуально отделены друг от друга и ни разу не взаимодействовали. Кроме рутинного животноводства, для предотвращения возможного привыкания избегали всякого человеческого взаимодействия.
Родительские запасы: Экспериментальный проект
Лечение и сбор яиц проводились в возрасте 32, 52 и 72 недель. Для формирования групп потомства, равное количество плодородных яиц (отбираемых с течением времени, предпочтение отдавалось недавним, а не старым) от всех родительских стад высиживалось через 1 день после окончания стрессовых ситуаций, а потомство от каждого материнского возраста рассматривалось как копии. Эта экспериментальная конструкция позволила нам работать с большим размером образца, но это также привело к тому, что копии путают с инкубаторными установками, переводом и размещением цыплят из инкубатора в загоны, а также составом яйца, так как питательная ценность яйца меняется с возрастом курицы.
Родительские запасы: Контроль и лечение материнского стресса
Каждая стая селекционеров была случайным образом назначена либо на контроль, либо на лечение от материнского стресса ("РС") с двумя стадами репликатов на штамм и на лечение. В контрольной группе строго соблюдалось регулярное содержание животных, в то время как самки стада МС подвергались ежедневным сеансам лечения от острого психологического стресса, которые отбирались на основании их способности увеличивать концентрацию кортикостерона в плазме крови у птиц. Так как средний срок производства яиц с начала вителлогенеза до момента откладки составляет 8 дней, каждая стая МС получала минимум 8 дней подряд стресс-факторов до начала сбора яиц.
Курицы из стада МС подвергались каждой из следующих процедур: Курицы равномерно распределялись по двум пластиковым ящикам (89 см длиной × 60 см шириной × 26 см высотой; 12 куриц/ящик) с последующим 15-минутным переносом. Курицы по отдельности вынимались из домашних ручек и помещались в тканевый мешок, расположенный в соседнем помещении, на 10 мин. физической сдержанности. Курицы были разделены на две группы по 12 птиц, перевезены в пустую комнату в 400 м от их домашнего загона и перенесены на испытательный полигон (100 см длиной × 100 см шириной × 200 см высотой), состоящий из сплошных белых панелей с двумя дверями, расположенными на противоположных стенах, и двумя светодиодными фонарями на потолке в течение 30 мин. На арене курицы были подвергнуты трем симуляциям атаки хищника (30 с/у) с использованием силуэта. Курицы были расфасованы в ящики и транспортированы на тестовый манеж на 15 минут. Воздушный рог дули в течение 3 с с 5-минутным интервалом [Японский перепел; европейский скворец]. Курицы были расфасованы в ящики и доставлены на испытательный полигон на 30 мин. с другим сортом [курица-несушка]. После каждого стрессового сеанса всех птиц сразу же возвращали в домашние загоны. В целом, сеансы проходили в соответствии со следующими критериями: Стаи подвергались одному стрессу в день. Стресс-факторы и сбор яиц осуществлялись до тех пор, пока не было собрано общее количество яиц, необходимое для инкубации. Во избежание снижения физиологической реакции на стресс-факторы в результате повторного воздействия минимальный интервал между применением одного и того же стресс-фактора составлял 4 дня. Сеансы проходили в случайном порядке с 9:00 до 16:00.
