2 подписчика

ПЦР в реальном времени

273 прочитали

ПЦР в реальном

ПЦР в реальном  времени (или количественная ПЦР)— лабораторный метод, основанный на методе полимеразной цепи реакции, используется для одновременной амплификацииии измерения количества данной...

времени (или количественная ПЦР)— лабораторный метод, основанный на методе полимеразной цепи реакции, используется для одновременной амплификацииии измерения количества данной молекулы ДНК. Метод ПЦР в реальном времени включает в себя одновременно детекцию и количественное определение (измерение непосредственно количества копий, либо измерение копий относительно внесённой ДНК или дополнительных калибровочных генов) специфической последовательности ДНК в образце.

Метод использует общие принципы ПЦР. Основное отличие состоит в том, что измеряется количество амплифицированной ДНК в реальном времени после каждого цикла амплификации. Для количественного определения используют два метода — флюоресцентные красители, интеркалирующие  в двуцепочечные молекулы ДНК, и модифицированные олигонуклеотиды (ДНК-зонды), которые флюоресцируют после гибридизации с комплементарными участками ДНК.

Применение ПЦР

ПЦР в реальном времени широко используется для решения многих исследовательских задач в лабораториях. Кроме того, этот метод нашёл применение в медицине (для диагностики заболеваний) и в сфере биотехнологий (для определения содержания микроорганизмов в продуктах питания и растительных материалах; для детекции ГМО). Также кПЦР используется для генотипирования вирусов и других патогенов человека и определения их количественного содержания.

Схема ПЦР
Схема ПЦР