Липазы — группы ферментов, основной функцией которой является ускорение распада триглицеридов до глицерина и жирных кислот. Эти ферменты вырабатываются кишечником, желудком, печенью, но наиболее важное значение для диагностики имеет липаза, вырабатываемая поджелудочной железой — панкреатическая липаза. В норме в общий кровоток попадает небольшое количество панкреатической липазы. Однако при заболеваниях поджелудочной железы, уровень активности липазы в сыворотке крови резко возрастает в течение 12-48 часов (особенно при остром течении заболевания). Тесты на панкреатическую липазу являются важным звеном при комплексной неинвазивной диагностике заболеваний поджелудочной железы.
Исследование на панкреатическую липазу в ветеринарии в основном используется при подозрении на панкреатит. Наиболее точным клиническим признаком наличия панкреатита у собак и кошек является повышение уровня в крови пищевого фермента панкреатическая липаза, причем она строго видоспецифична у собак и кошек.
Исследование панкреатической липазы у собак (canine Pancreatic Lipase Immunoreactivity, сPLI)
У собак чувствительность сPLI для выявления панкреатита составляет 65–82% в зависимости от тяжести заболевания, со специфичностью более 95%. Исследования показывают, что при почечной недостаточности наблюдается минимальное повышение концентрации сPLI, которая не зависит от приема преднизолона и наличия гастрита, в отличие от активности сывороточной липазы. Исследование PLI сыворотки крови у собак с экзокринной недостаточностью поджелудочной железы показало значения ниже референсного диапазона, что позволяет сделать вывод о 100% диагностической чувствительности метода.
Исследование панкреатической липазы у кошек (feline Pancreatic Lipase Immunoreactivity, fPLI)
У кошек чувствительность fPLI исследования в диагностике панкреатита составляет 54–100% в зависимости от тяжести заболевания, со специфичностью 91%. У кошек с легкой или хронического формой панкреатита чувствительность метода составляет 54%. Такой уровень чувствительности выше, чем у любого неинвазивного метода исследования при панкреатите
(включая исследования активности амилазы и липазы, трипсиноподобной иммунореактивности сыворотки, рентгенографии, УЗИ брюшной полости, компьютерной томографии). Однако чувствительность и специфичность метода исследования fPLI в случаях панкреатита от умеренного до тяжелого составляют 100%. В экспериментальной модели панкреатита у кошек было установлено, что уровень fPLI остается повышенным дольше, чем уровень трипсиноподобной иммунореактивности в сыворотке крови (fTLI). В настоящее время данный лабораторный вид исследования является наиболее надежным в диагностике умеренного и тяжелого панкреатита у собак и кошек.
Для более точных результатов желательна голодная диета перед проведением исследования.
Для проведения данного теста сначала врач-лаборант берет у животного кровь из вены в пробирку, а потом ставит эту пробирку в центрифугу на 15 минут для получения сыворотки крови.
После того, как сыворотка получена, врач-лаборант разводит сыворотку с буферным раствором, капает на тест-планшет и ставит в аппарат инкубироваться 15 минут.
Сам принцип экспресс-теста основан на реакции иммунофлуоресценции – поглощении квантов света веществом, способным флуоресцировать, т.е. светиться.
По истечении времени, аппарат выводит результат, который заносится в историю болезни для дальнейшей интерпретации лечащим врачом. Показатели могут быть следующими:
При показателях выше 3,5 µg/L (для кошек) и выше 200 µg/L (для собак) – уже является основанием для постановки диагноза – панкреатит.
Показатели выше 3,5 µg/L (для кошек) и выше 200 µg/L (для собак) – уже являются основанием для постановки диагноза – панкреатит.
Нормальный уровень липазы не исключает, к сожалению, наличие панкреатита. Около 15-20 % животных с острым панкреатитом могут иметь нормальный уровень активности липазы или амилазы (или их обоих).
Стоить отметить, что ни один диагностический тест не является на 100% чувствительным или специфическим, и клинический диагноз следует интерпретировать в сочетании с клиническими признаками, анамнезом, клиническим осмотром, результатами биохимического анализа крови и сыворотки крови, а также данными УЗИ брюшной полости.
Для диагностики заболеваний, связанных с панкреатической липазой, в наших ветеринарных центрах Беларуси и России используется ветеринарный количественный иммунофлюоресцентный анализатор Healvet, который позволяет получить результат менее чем за 15 минут.