Участия в спектаклях МХАТа начались уже со второго курса. Первой ролью Брусникина стал Александр Ильич Ульянов в спектакле «Путь». После окончания в 1982 году актерского факультета сразу был принят в труппу Московского Художественного театра им. А.П. Чехова. Преподавательская деятельность В 1982 году Брусникин занялся преподавательской деятельностью в учебном заведении, которое окончил. Сначала - ассистентом по актерскому мастерству, а в 1993 году смог набрать свой первый курс в качестве преподавателя. Годы преподавания и усердной работы привели к тому, что на базе курса в школе-студии МХАТ появилась Театр-мастерская Дмитрия Брусникина. С 1999 по 2003 годы Брусникин был членом Ученого совета Школы-студии МХАТ, в 2006 году стал профессором. В 2017 году «Мастерская Дмитрия Брусникина» в полном составе вошла в труппу московского экспериментального театра «Практика», а в 2018 году Департамент культуры города Москвы назначил Брусникина руководителем Экспериментального театрального центра