Кроме самого инкубатора и питательных сред, в которых находится эмбрион от пункции до переноса, другим важным элементом этой цепочки является сама пластиковая чашка. Именно в нее эмбриолог наливает раствор для культивирования и сажает в него эмбрион. В этой чашке эмбрион может находиться целую неделю без перерыва и выходных. От ее производства может зависеть не только количество сформированных бластоцист и их качество, но и даже процент хромосомных отклонений в эмбрионах. Если качество пластиковых одноразовых изделий контролируется на производстве недостаточно, в них могут содержаться токсичные для репродуктивных клеток человека компоненты. Это явление называется репротоксичностью.
Репротоксичность можно уменьшить, используя пластиковые чашки, которые были тщательно протестированы с помощью чувствительных биологических анализов. Известно, что тест на мышиных эмбрионах (Mouse Embryo Assay или MEA-тест) и анализ выживаемости сперматозоидов человека (HSSA) эффективны при обнаружении токсичных для ЭКО компонентов. У себя в лаборатории я выбрал для работы пластиковые чашки от компании Vitrolife, т.к. она разработала наиболее чувствительные протоколы MEA. Ключевыми отличиями их теста являются следующие моменты:
· 1-клеточный MEA. Эмбрионы наиболее чувствительны на стадии одной клетки. Использование этой отправной точки для MEA делает анализ более чувствительным.
· Специально разработанная тестовая среда. Белок может скрывать потенциально репротоксичные компоненты. Поэтому для повышения чувствительности MEA используется специально разработанная безбелковая среда.
· Множественные критерии оценки развития эмбриона и оценка внутриклеточной массы. Эмбрионы оценивают в определенные моменты развития и с использованием нескольких критериев. Подсчет количества клеток в бластоцисте позволяет определить жизнеспособность эмбриона.
На фото представлена чашка с пятью лунками для культивирования эмбриона, которые я использую в лаборатории Балчуг Клиник. Чашка имеет плоское дно, что дает плотный контакт с нагревательной поверхностью. В каждую лунку помещается культуральная среда, которая покрывается маслом, чтобы избежать испарения воды. Лунки окружены воздушной прослойкой или средой, что обеспечивает однородность температуры и жизнеспособность эмбрионов. Таким образом, эмбрионам обеспечивается теплая, безопасная и мягкая среда для роста.
